复方苦豆子灌注液总生物碱含量测定方法的建立

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1、动物医学进展，２０１４，３５（１２）：８９－９２ＰｒｏｇｒｅｓｓｉｎＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ复方苦豆子灌注液总生物碱含量测定方法的建立辛任升１，刘宇２，张超２，梁剑平１，２＊（１．甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州７３００７０；２．中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，农业部兽用药物创制重点实验室，甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃兰州７３００５０）摘要：为建立复方苦豆子灌注液总生物碱含量的测定方法，采用酸性染料比色法，以氧化苦参碱为对照品进行含量测定，检测波长４２０ｎｍ的吸光度。结果显示，氧化苦参碱在２．０μｇ／ｍＬ～１０μｇ／ｍＬ范围内与吸光度呈良好线性关系，回归

2、方程为Ａ＝０．００５８Ｃ＋０．１１１６，ｒ＝０．９９９２，氧化苦参碱的平均回收率为９９．６％，ＲＳＤ＝２．２０％（ｎ＝５）。该方法简便灵敏、准确可靠，可作为复方苦豆子灌注液的质量控制方法。关键词：复方苦豆子灌注液；酸性染料比色法；总生物碱；氧化苦参碱中图分类号：Ｓ８５３．７２文献标识码：Ａ文章编号：１００７－５０３８（２０１４）１２－００８９－０４苦豆子（Ｓｏｐｈｏｒａａｌｏｐｅｃｕｒｏｉｄｅｓ）是豆科槐属多电热恒温鼓风干燥箱，上海鸿都电子科技有限公司年生草本植物苦豆子的干燥种子，别名香豆、布亚产品；ＰＨＳ－３Ｃ型精密ｐＨ计。氧化苦参碱对照品由（维名）、苦甘草、苦豆草、苦豆

3、根、胡兰－宝雅（蒙语）中国食品药品检定研究院提供，复方苦豆子灌注液等。主要分布于我国西北各省区（宁夏、新疆、内蒙为本实验室自制，试验中用到的其他试剂均为分析古、甘肃、青海、西藏等）荒漠区内较潮湿的地段及中纯。［１－２］１．２方法亚细亚一带。苦豆子用途广泛，野生资源丰富，不仅是优良耐盐碱和固沙植物，还是重要的药用植１．２．１供试液的制备物资源，具有很高的开发利用价值。宁夏回族自治１．２．１．１试液的配制ｐＨ７．６缓冲液的配制：０．１区已将苦豆子列入重点保护的六大地道药材之一。ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液５００ｍＬ，加０．１ｍｏｌ／Ｌ氢氧苦豆子味苦性寒，具有清热解毒、抗菌消炎、平喘

4、止化钠溶液４２２ｍＬ，蒸馏水７６ｍＬ，用酸度计校正ｐＨ为７．６。溴麝香草酚蓝ｐＨ７．６缓冲液的配制：精密咳、止痛杀虫之功效，可用于急性痢疾、肠炎、胃痛等［３］称取溴麝香草酚蓝０．０６２５ｇ，置于５００ｍＬ容量瓶，多种疾病的治疗。因此，大力开发利用苦豆子资加入上述缓冲液至刻度，摇匀即得。源，不仅对医疗有巨大作用，而且对社会、经济以及１．２．１．２对照品溶液的制备精密称取１０５℃干生态环境都具有重要意义。燥至恒重的氧化苦参碱对照品５．０ｍｇ，置于５ｍＬ复方苦豆子灌注液由苦豆子、川芎、黄芩、益母容量瓶中，加无水乙醇溶解并定容至刻度，作为对照草、当归５味中药制备而成。主要含有生物碱

5、、黄品储备液（１．０ｍｇ／ｍＬ）。酮、多糖、有机酸等有效成分，具有抗肿瘤、抑菌、抗１．２．１．３样品供试液的制备精密吸取复方苦豆病毒、免疫调节等功效。本试验采用酸性染料比色子灌注液０．５ｍＬ，置于５０ｍＬ容量瓶中，置于干燥［４－６］法，以氧化苦参碱为对照品测定复方苦豆子灌注箱内４５℃烘干水分，待冷却，加入无水乙醇溶解并液中总生物碱的含量，并对其方法学进行考察，旨为定容至刻度线作为样品供试液。该制剂的质量控制标准提供理论依据。１．２．２检测波长的选择取氧化苦参碱对照品溶１材料与方法液４０μＬ置于５０ｍＬ具塞锥形瓶中，烘箱内４５℃挥１．１材料尽乙醇，精密加入溴麝香草酚蓝ｐＨ７．

6、６缓冲液１０Ａｇｉｌｅｎｔ－８４５３紫外－可见分光光度计，美国安捷ｍＬ，氯仿１０ｍＬ，盖紧瓶塞，持续振荡２ｍｉｎ，将溶液伦公司产品；ＱＬ－９０１旋涡混合器，江苏海门市麒麟转移至６０ｍＬ分液漏斗中静置２ｈ，分取氯仿层，以医用仪器厂产品；ＨＭ－２０２型分析天平；ＤＨＧ－９０７０未加氧化苦参碱分出的氯仿为空白对照，在２００ｎｍ收稿日期：２０１４－０４－１２基金项目：“十二五”农村领域国家科技计划项目（２０１１ＡＡ１０Ａ２１４）作者简介：辛任升（１９８７－），男，山东青岛人，硕士，主要从事中草药开发与利用。＊通讯作者９０动物医学进展２０１４年第３５卷第１２期（总第２５８期）～６００

7、ｎｍ之间进行波长扫描。ＲＳＤ值。１．２．３线性关系考察用微量移液器分别取０、１．２．７加样回收率试验精密吸取已知含量的样２０、４０、６０、８０、１００μＬ对照品溶液，置于１～６号５０品溶液５份，每份０．５ｍＬ，分别置于５０ｍＬ具塞锥ｍＬ具塞锥形瓶中，烘箱内４５℃挥尽乙醇，精密加形瓶中，再加入一定量的氧化苦参碱对照品，作为加入溴麝香草酚蓝ｐＨ７．６缓冲液１０ｍＬ，氯仿１０样回收率供试品溶液，按１．２．１．３项试验方法进行ｍＬ，持续振荡２ｍｉｎ，将溶液转移至６０ｍＬ分液漏测定，计算回收率。斗中静置２ｈ，分取氯仿层，以未