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时间:2019-08-13
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1、紫甘蓝中花青素提取实验报告 紫甘蓝中花青素的提取 花青素具有很强的抗氧化作用,具有清除体内自基、过敏、保护胃粘膜等多种功能,引起了国内外学者广泛关注。目前抗变异、抗肿瘤、抗,对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。 1、实验原理 紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物,极性较高,可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。根据相似相溶的原则,本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂,采用大孔吸附树脂法分离提纯。大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用,使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离
2、。紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞,使花色素尽可能多的溶解。为了防止花色素的降解以提高其溶出率,可在其中加入1%盐酸。八层纱布过滤后,留一小烧杯备用,剩余的用大孔树脂除杂,加入200ml15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质,让树脂吸附花色素,再用60%乙醇洗脱,解析得到乙醇和花色素的混合液。将过柱的溶液以HCl:混合液=1:4的比例混合至烧杯中,在90。C的水浴锅中水解一小时,以破坏花色素的糖苷键,使花色素均以花青素的形式存在。此时,用20ml纯水除杂,用无水乙醇洗脱,得到较为单一的花青素与乙醇混合液。在旋转蒸发仪上蒸干
3、。 2、材料、药品与仪器 新鲜紫甘蓝 15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪3、实验步骤 配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用 称取新鲜紫甘蓝叶片,量取60%+1%HCl混合液300ml,同 时放入组织捣碎机中捣碎,浸提 所得固液混合物用8层纱布过滤,取一点滤液备用,剩余滤液1:5加水稀 释得色素原液 将备用滤液再用滤纸过滤,用浸提剂做空白,测定其对520nm光
4、的吸光度。 并作标准曲线。 装柱上样,相交换柱加入大孔吸附树脂,向其中加入色素原液分离色素,然 后加入15%乙醇除杂,最后加入60%乙醇洗脱得到花青素+花色素苷+乙醇混合液 按盐酸:混合液=1:4的比例将混合液与盐酸混合,90。C水浴加热一小时。 得到花青素与乙醇混合液 用无水乙醇洗脱,转移至圆底烧瓶,置于旋转蒸发仪上蒸干,干重为 4、实验结果 花青素含量标准曲线为 紫甘蓝捣碎榨汁后得到深紫色溶液,过滤静置稀释测得OD值为曲线可得到花青素含量为/L。干重花青素为,得率为%纯化率=实测干重/理论干重=/×=%。
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