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《用反胶束萃取法提取与分离蛋白质和酶_陆强》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、《生物工程进展》1992,Vol.12,No.用反胶束萃取法提取与分离蛋白质和酶陆强.一施李宽宏亚钧(华东化工学院化学工程研究所上海200237):本文介提要绍了反胶束革取的概剂在有机溶剂中自发形成的纳米尺度的一种聚、、,。、念体系革取原理及分配影响因素综述了这集体反胶束溶液是透明的热力学稳定的系。。一技术在蛋白质和酶的分离与纯化中的应用统表面活性剂是由亲水的极性头和疏水的非关健词:反胶束苹取;蛋白质,分离。极性尾两部分组成的两性分子在反胶束溶液,,利用基因工程及细胞工程和发酵生产的蛋中组成反胶束的表面活性剂它的
2、非极性尾,,,白质类产品的提取方法既要有高选择性又向外伸入非极性有机溶剂主体中而极性头则。要不影响产品的生物活性传统的提取方法难polarcore)。向内排列形成一个极性核(此,于满足以上要求限制了许多生物技术产品的极性核具有溶解水和大分子(如蛋白质)的能。。工业化液液萃取技术尽管已在抗生素工业中力有机溶剂中表面活性剂浓度超过临界胶束,,,。广泛应用发挥其优良分离性能和作用但难浓度(CMC)时才能形成反胶束溶液这是体于,,、、应用于蛋白质的提取与分离主要原因是难系的特性与表面活性剂的化学结构溶剂。。,以找到一种合
3、适的萃取剂许多蛋白质不溶于温度和压力等因素有关在非极性溶剂中。,.1.omM。有机溶剂若使它们与有机溶剂接触还会引CMC值的变化范围是0一1〔3〕。、起变性反胶束萃取就是在这一背景下发展起阴离子表面活性剂阳离子表面活性剂和以~匀,。来的一种新分离技术反胶束萃取具有液非离子型表面活性剂都可用于形成反胶束常,且、液萃取的优点反胶束内的环境接近细胞内见的反胶束系统及其相图结构和稳定性等可〔,,,。的环境5〕蛋白质不易变性为蛋白质和酶的参阅文献〔16〕在反胶束萃取蛋白质的研。,-提取与分离开辟了一条新的途径究中用得最多的
4、是阴离子表面活性剂tAer050,,,,1OT(简称AOT)〔346〕其结构式见。,、图1这种表面活性剂容易获得它具有双一反胶束萃取蛋白质的原理,,链极性头较小形成反胶束时不须加助表面.〔,,反胶束系统的物理化学性能活性剂3淘并且它所形成的反胶束较大有reverseeee反胶束(dmill)是表面活性.通讯联系人.anea8CosmDtl:DeveloPBiolStandard的:注4:Hool么erDetal:1991国际细胞因子研讨会论文摘要,.9198815osteretal:Caneer67:271991
5、W拐.‘,、.aneenea:oeenoov:.erranna9VlRWtlBi/thlgg4716HmFetl:Leukemia4:671199019.:9017王树柯等中华血液杂志待发表..’rn:o.10KiiBKKPATNJ0200048218:122:1011992郭坤元等第一军医大学学报().:6:1,注91马大龙等中国免疫学杂志(3)82901仇:曹振东北京医科大学硕士学位论文注992.,‘:,._12冯岚等生物化学和生物物理进展杂志待印刷19220SasakiHetal;Anti。。neerRes
6、夕ar窄h12:313.,,:19玛冯岚等生物化学杂志待印刷93妇92一羚一’对一个由水、表面活性jlJ和非极性有机溶,剂构成的三元系统根据三种成分的相对含,。量它们的混合物显示出多种结构形式图2。是这种混合物的一个三元相图示例〔4〕c1C只践!一C氏CH:,H了__,/牙勺气CH皿ha、:。。叔反抓七CH,‘液益了、珑lc珑~CH.两柑区反胶束溶液水相/图。.1AOT的结构式~一~户一声一~.护~户.动一一~.〔幻。利于大分子蛋白质进入当表面活性剂为异辛烧,。AOT时最常使用的有机溶剂为异辛烷溶解于反胶束中的
7、水量,常r用W。‘(二〔:o〕s二raetont,H/〔f〕)表示定义为反胶束中所图2‘水一AOT一异辛烷系统相图。碑含水份与表面活性剂的摩尔比这是一个极其,买图中可知能应用于蛋白质分离的是位于相,重要的参数由于每个表面活性剂极性头有一,图底部的两相区此时三元混合物分为平衡的,,定的有效面积因此它决定了反胶束的大小和,一相是含有极两个相少量有机溶剂和表面活。每个反胶束中表面活性剂的分子数反胶束溶,性剂的水相另一相是作为萃取剂的反胶束溶,,。液在与水相平衡的情况下W值与表面活性剂,。液它们的组成关系用系线来表达、、
8、和溶剂的种类助表面活性剂水相中盐的蛋自质的萃取过程和萃取后的情况示意于。:O种类和盐的浓度等有关对AOT/异辛烷/H体系,溶解于反胶束中的最大含水量,为W。=,,60〔〕超过这一数值透明的反胶束溶液将变,。为浑浊并发生分相J,,.反胶束的形状通常为球形也有人认为反:有机柑::二二二二:二:二:二:二匕〔。八下二-胶束应是椭球形或棒形3〕反胶束尺寸可由理水,,论模型〔7〕计