复合反胶束后萃花生蛋白提取条件优化.pdf

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1、2014年4月中国粮油学报Vo1．29．No．4第29卷第4期JournaloftheChineseCerealsandOilsAssociationApr．2014复合反胶束后萃花生蛋白提取条件优化郭珍陈复生李润洁(河南工业大学，郑州450001)摘要花生是世界上非常重要以及研究最为广泛的一种油料作物，同时又富含24％～36％的蛋白质。研究AOT—SDS／异辛烷一正辛醇复合反胶束技术萃取花生蛋白，考察了pH、KC1浓度、温度以及时间对花生蛋白后萃率的影响，采用四因素二次通用旋转组合设计试验，并对试验结果进行方差分析，回归分析建立回归方程，采用频率分析法获得了花生蛋白后萃的最佳工艺条件：

2、pH7．5、时间30min、KC1浓度1．1mol／L、温度35℃，在此条件下得到的后萃率为79．O3％。关键词花生蛋白二次通用旋转组合复合反胶束优化中图分类号：TS201．2文献标识码：A文章编号~1003—0174(2014)04—0082—05花生是我国主要的油料资源，同时富含24％～厂；十二烷基硫酸钠(SDS)：天津市科密欧化学试剂36％的蛋白质。花生蛋白含有多种必需氨基酸，不有限公司；异辛烷、正辛醇，磷酸二氢钾、磷酸氢二含胆固醇⋯。与大豆蛋白相比，抗营养因子较少，可钾，氯化钾均为分析纯。消化性强。目前我国利用花生制油过程造成了花生1．3试验仪器蛋白的损失与变性，因此，探寻一种新

3、型制备花生蛋BS210S型电子天平：德国Sa~ofius公司；GL一白技术有着重要的意义。20L型高速冷冻离心机、ZSD一2J型自动水分滴定反胶束萃取技术是一种新型的可用于提取具有仪：上海安亭电子仪器厂；pH211型酸度计：意大利生物活性物质的技术j。已有研究显示，反胶束萃HANNA公司；NichipetEXII型移液枪：日本Nichiryo取技术可以实现大豆中蛋白质和油脂同时分离，并公司；UV一1901型紫外分光光度计：北京普析通用减少蛋白质的变性，且大多数采用的都是AOT单一仪器有限责任公司；KQ一250B型超声波清洗器：昆反胶束体系，而研究发现，把不同类型表面活性剂混山市超声仪器有

4、限公司。合起来制备可以形成具有良好性质的混合反胶束体系，增加增溶水量I4J，因此本试验将阴离子表面活2试验方法性剂AOT与SDS混合配制复合反胶束进行研究。2．1蛋白质标准曲线制作]本试验采用AOT—SDS／异辛烷一正辛醇复合反以牛血清蛋白为标准，紫外分光光度计测定不同胶束对花生蛋白进行提取，考察pH、时间、KC1、温度浓度标准蛋白液在280nm处吸光值，以蛋白质浓度为对后萃率的影响，采用二次通用旋转组合设计，以后横坐标，对应吸光值为纵坐标绘制标准曲线，见图1。萃率为指标获取较佳工艺条件，为反胶束在花生蛋白提取过程中的应用获得数据指导。1材料与仪器1．1试验原料全脂花生粉：河南帝鑫食品有

5、限公司。1．2主要试剂丁二酸二异辛酯磺酸钠(AOT)：上海海曲化工基金项目：国家自然科学基金(21176058，31201293)，河南工业蛋白质含量／mg／mL大学博士基金(2010BS014)收稿El期：2013—06—22作者简介：郭珍，女，1988年出生，硕士，食品资源开发与利用图1280nm处牛血清白蛋白浓度与吸光值的关系第29卷第4期郭珍等复合反胶束后萃花生蛋白提取条件优化832．2AOT／SDS反胶束溶液配制表2(续)称取1．6gAOT与1．2gSDS表面活性剂置于试验号因素后萃肇CD／％100mL锥形缓冲溶液瓶中，同时加入32mL异辛烷，85．513mL正辛醇和适量pH为

6、8的KH2PO4一K2HPO4缓77．68冲溶液，磁力搅拌使之混合均匀，再超声处理一定时85．12间至溶液透明。76．512．3蛋白质前萃液的配制72．2062．80按0．01g／mL将全脂花生粉加入配制好的反胶37．35束溶液中，在35。【=条件下超声15min，超声功率为50．00210W，然后以3000r／min的速度离心15min，取上72．98清液(即前萃液)，采用紫外分光光度法在280nm处6o．85测其吸光值。35．402．4蛋白质后萃液的配制及后萃率的计算35．71取一定体积的前萃液与等体积的一定浓度一定58．89pH的KC1的KHPO4一KHPO4缓冲液混合，超声处71

7、．8169．85理一定时间后在4000r／min条件下离心15min，取69．07下层水相(后萃液)在280nm处测其吸光值。67n¨H加如42．83蛋白质后萃率=后萃液中蛋白质量(g)／前萃液76．90中蛋白质量(g)×100％69．072．5二次通用。旋转试验设计2oooooooo00oo070．63选取pH、时间、KC1、温度4个因素进行优化试64．37验。主要以蛋白质后萃率作为评价指标，采用二次86．69。。oo2ooooo