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《实时定量 PCR 法对牛肉中鸡源性成份的量化检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第6卷第2期食品安全质量检测学报Vol.6No.22015年2月JournalofFoodSafetyandQualityFeb.,2015实时定量PCR法对牛肉中鸡源性成份的量化检测*胡智恺,宋丽萍,姜洁,薛晨玉,郭淼,王丹,赵琳娜(北京市食品安全监控和风险评估中心生物室,北京100041)摘要:目的实现样品中牛源性成份和鸡源性成份的量化分析。方法通过在基因组单拷贝基因上设计引物,绘制模板DNA扩增标准曲线以及确定牛肉、鸡肉质量与DNA浓度的比值常数,利用实时荧光定量PCR技术对四种不同掺混比例的牛鸡瘦肉混合样本中牛源性成份和鸡源性成份所占的质
2、量百分比含量进行分析。结果通过荧光实时定量PCR反应的Ct值、模板DNA扩增标准曲线和质量与DNA的比值常数可以计算出样品中所含牛源性成份和鸡源性成份的质量百分比含量,检测值与理论值之间的绝对误差可控制在5%以内,量化研究结果基本准确。结论对于组织成份单一的样品,可以通过在基因组单拷贝基因上设计特异性的引物,利用PCR技术实现在质量水平上对食品中动物源性成份的量化分析,该技术方法的建立可以为肉类掺假监管工作提供有力的技术支撑。关键词:肉类掺假监管;量化研究;实时荧光定量PCR;鸡肉;牛肉Real-timePCRmethodforquantitat
3、ivedetectionofchickenblendinginbeef*HUZhi-Kai,SONGLi-Ping,JIANGJie,XUEChen-Yu,GUOMiao,WANGDan,ZHAOLin-Na(BeijingMunicipalCenterforFoodSafetyMonitoringandRiskAssessment,Beijing100041,China)ABSTRACT:ObjectiveToquantitativelyanalyzethebeefandchickeninblendingsamples.MethodsThepr
4、imersweredesignedaccordingtothesequenceofthesinglecopygene.AseriesofgenomeDNAwereusedasstandardcurveinreal-timePCR.ThemathematicalconversionparametersaboutthemassofmeatandDNAweredetermined.Theweight/weightequivalentsofbeefandchickeninfourblendingsampleswereanalyzedusingreal-t
5、imePCR.ResultsTheweight/weightequivalentsofbeefandchickenwasdeterminedbycalculatedusingCt,standardcurveandthemathematicalconversionparametersaboutthemassofmeatandDNA.Theresultsshowedthattheabsoluteerrorofdetectionwithatoleranceoflessthan5%.ConclusionQuantitativeanalyzingofthe
6、compositionoftheanimalspeciesinsinglecomponentsamplecouldberealizedusingreal-timePCRbydesigningtheprimeraccordingtothesequenceofgenome.Thisresearchcouldprovidetechnicalsupportforfoodsafety.KEYWORDS:meatadulteration;quantitativeanalysis;real-timePCR;chicken;beef基金项目:北京市科委重大专项(
7、食品中植物生长调节剂与物种成分风险多指标同步筛查鉴别和定量技术研究)Fund:SupportedbyKeyProgramforBeijingMunicipalScience&TechnologyCommission(MultiIndicatorSynchronousScreeningIdentificationandQuantitativeResearchonthePlantGrowthRegulatorandSpeciesCompositionofFood)*通讯作者:宋丽萍,博士,副高级工程师,主要研究方向为生物化学与分子生物学。E-mail
8、:slp_0705@sina.com*Correspondingauthor:SONGLi-Ping,SeniorEngineer,Be
