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1、猪ATF4基因真核超表达载体的构建及鉴定陈超吴望军熊远著华中农业大学农业部猪遗传育种重点开放实验室，武汉430070摘要：克隆猪ATF4基因CDS，构建pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达载体，为下一步在细胞水平和个体水平研究该基因功能奠定基础。提取RNA,运用RT-PCR和巢式PCR技术扩增猪ATF4全部编码序列，克隆转化到pMD18-T载体中，测序验证后，酶切连接到pcDNA3.1(+)载体中，构建成pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达栽体，对其进行酶切和测序鉴定并在细胞水平上进行表达
2、量的鉴定。实验结果表明，在转染了pcDNA3.1(+)-ATF4载体的细胞中，ATF4mRNA表达水平明显增加，成功构建了pcDNA3.1(+)-ATF4真核超表达载体，为进一步研究该基因的功能奠定了基础。猪；ATF4;栽体构建；瞬时转染S813.1AConstructionandIdentificationofpcDNA3.1(+)-ATF4ofPigChenChaoWuWangjunXiongYuanzhu国家重点基础研究发展规划(973计划)项目“品质性状形成的分子基础”(2006CB10210
3、2)。第一作者简介：陈超，男，1984年出生，山东滕州人，硕士，研究方向：分子生物学与分子育种。通信地址：430070湖北省武汉市洪山区狮子山街1号、华中农业大学动物科技学院，Tel:027-87283700，E-mail：chencha08341@webmail.hzau.edu.cn。通讯作者：熊远著，男，1930年出生，湖北省竹山人，中国工程院院士，教授，研究方向：动物遗传育种，创建了中国第一个种猪测定中心，先后主持了国家及省部级重大科研项目30余项，获国家科技进步奖5项，省部级科技进步奖10余
4、项。发表学术论文100多篇，主编专著4部。通信地址：430070湖北省武汉市洪山区狮子山街1号、华中农业大学动物科技学院，Tel：027-87284286，E-mail：xiongyzh@mail.hzau.edu.cn。2011-01-212011-03-31·7.·8··9·@@[1]SiuF,BainPJ,LeBlanc-ChaffinR,etal.ATF4isamediatorofthenutrient-sensingresponsepathwaythatactivatesthehumanas
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