支原体在性传播感染中的作用及其耐药机理研究

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1、东南大学博士学位论文支原体在性传播感染中的作用及其耐药机理研究姓名：王蓓申请学位级别：博士专业：劳动卫生与环境卫生学指导教师：浦跃朴20061001中文摘要题目：支原体在性传播感染中的作用及其耐药机制研究博士研究生姓名：王蓓导师姓名：浦跃朴教授毕业学校：东南大学研究背景与目的：支原体是一类大小介于细菌与病毒的能在体外培养基中生长繁殖的最小的微生物．广泛存在于动物、植物和人类，已确定的对人类有致病性的支原体主要有7种，它们是肺炎支原体(^和)、解脲脲原体(Uu)，人型支原体(胁)、生殖支原体(^客)、发酵支原体(^卯、穿通支原

2、体(Mpe)和梨支原体(坳f)，除坳以外，其余6种支原体均可通过性传播而导致男女泌尿生殖系统感染，后3种因与AIDS的发展和结局有关而被称为艾滋病相关支原体。随着研究手段和检测方法的发展，人们观察到越来越多的支原体“正常携带”现象，尤其是强和^锄，因此近年来，人们对支原体的致病性提出了疑义，并在临床上采取了不向的处理方式；与此同时，在对支原体感染进行必要的治疗时，支原体不断产生和变化着的耐药性则成为人们不得不关注的问题。同时。我国对HIV／AIDS人群的支原体感染状况研究相对较少。针对这种状况，研究者在国家自然科学基金和江苏

3、省预防医学基金项目的资助下，开展了一系列研究，主要研究目的是：1、全面了解Uu、Mh、Mg、Mr．Mpe和gpi等6种支原体在HIV阳性者、AIDS患者、其他性病患者及高危人群、妇科生殖道炎症患者、健康女性和男性等多种不同人群中的流行特征；2、在女性人群进一步探讨Uu和埘l的致病性；3、研究Uu和Mh的耐药现状并提出合理的用药建议；4、探讨Uu对四环素类、氟喹诺酮类和大环内酯类药物的耐药机制：5、研究支原体与淋病奈瑟菌的合并感染状况及淋病奈瑟菌的耐药性和耐药机制。主要研究内容和方法：I、研究对象分别来自江苏省南京、南通(苏中

4、地区)、无锡(苏南地区)以及徐州(苏北地区)的性病监测医院或，和门诊就诊者，某综合性医院妇科门诊患者。部分单位健康体检者，以及省内几个主要地区的HIV阳性者和AIDS患者。2、采用流行病学现况调查的方法，在上述各人群中开展问卷调查、采集泌尿生殖道分泌物标本或，和首段屎，并对每个个体进行医学检查和临床诊断。3、用法国梅里埃支原体培养及鉴定试剂进行【厄与^锄的初步分离和鉴定，并进一步经过滤培养和特异性PCR试验进行确认，对其中部分(，“菌株采用PCR为基础的限制性酶切多态分析(PCR-RFLP)方法进行基因分型(生物l型和生物2

5、型)；对艾滋病相关支原体Mg、^瓠Mpe和Mp采用套式PCR方法检测；其他生殖道常见致病病原体按临床微生物检验标准方法进行。4、比较HIV阳性者、AIDS患者、其他性病患者及其性病高危人群、健康体检者、妇科生殖道感染者等人群6种支原体检出情况，并分析其流行特征。5、在性病女患者、妇科炎症患者及女性健康体检者分析Uu、^扬的检出情况、比较其感染浓度(CCU)，分析支原体的致病性与感染浓度、基因分型的关系，并通过随访观察正常人群中支原体的自然消长情况及临床患者在实施抗支原体治疗前后，其l临床症状和支原体感染浓度的变化．6、采用叉

6、生分析法分析Uu，Mh与其它妇科生殖道常见病原体之间的交互作用．7、先期采用法国梅里埃支原体药敏试剂盒(内含强力霉紊、交沙霉素、氧氟沙星、红霉索、四环素、环丙沙星、阿奇霉素、克拉霉素和原始霉素等8种抗生紊)定性检测Uu，^枥临床分本研究项目基金：国家自然科学基金(30471488)；江苏省卫生厅预防医学基金(Y2002001，Y200408)I东南大学博士学位论文离株的耐药性．后期应用微量肉汤稀释法检测八种抗生索(包括四环素、米诺环素、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、环丙沙星、氧氟沙星和左旋氧氟沙星)对确认的￡啦．^抽的最小抑菌

7、浓度(Minimuminhibitoryconeen打ation，MIC)．8、按药敏结果分层，在部分【屈菌株中进行耐药基因检测和分析，包括用PCR扩增四环素耐药基因terM,氟喹诺酮耐药基因8yrA和pare的喹诺酮耐药决定区(QRDR)，并对扩增产物进行测序分析，采用Blast比对法比较临床菌株序列与标准菌株序列的差异。9、在各性病监铡点调查支原体与淋病合并感染状况。对淋球菌进行相应的药敏试验和耐药基因检测及序列分析。主要实验技术和方法与支原体研究相同。lO、根据资料类型和分析需要，建立EPIDATA和EXCEL数据库。

8、采用’SAS8．2统计软件，结合实验结果和流行病学调查资料，选用f检验、，检验、方差分析、秩和检验、精确概率法、Logistic回归等方法对数据进行统计分析。主要研究结果：．1．支原体感染的流行特征研究结果：(1)来自江苏部分地区的HIV阳性者及AIDS患者【m、Mh、Mg、Mr,Mpe和