骨髓间充质干细胞复合多孔丝素蛋白体内体外的实验研究

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1、苏州大学硕士学位论文骨髓间充质干细胞复合多孔丝素蛋白体内体外的实验研究姓名：张希峰申请学位级别：硕士专业：外科学（小儿骨科）指导教师：王晓东20040401骨髓间充质干细胞复台多孔丝素蛋白体内体外的实验研究中文提要骨髓间充质千细胞复合多子L丝素蛋白体内体外的实验研究中文提要目的：观察骨髓问充质干细胞复合三种不同孔径的多孔丝素蛋白体外生长增殖，体内成骨、修复骨缺损的情况，初步探讨丝素蛋白做为细胞外基质材料的可行性及合适的孔径。方法：通过建立骨髓间充质干细胞体外分离、培养方法，收集用该方法扩增的细胞后接种复合三种不同孔径的多孔丝素蛋白，进行体外继续培养及体内移植治疗兔骨缺损模型的实验，采用倒

2、置显微镜、扫描电镜、激光共聚焦显微镜、大体形态、x线、组织形态学HE染色方法观察。结果：成功建立体外分离培养骨髓间充质干细胞的方法：复合三种不同孔径材料的体外培养中，细胞生长增殖形态、活力均正常，1tlPm孔径的材料上细胞生长增殖状况较好：复合物移植体内则有不同程度的成骨及骨缺损修复，78P{u孔径的材料成骨、骨缺损修复情况较佳，未发现三种材料的生物毒性及免疫原性反应现象，材料在体内可不同程度降解。结论：多孔丝素蛋白是一种良好的骨组织工程的细胞外基质材料，具有优秀的生物相容性、细胞吸附性及体内降解性，78Pro以上的孔径较为适合细胞组织生长。关键词：骨髓间充质干细胞，丝素，孔径，骨组织工

3、程作者：张希峰指导教师：王晓东主任医师——Exper—imenta—lstudy—o—n——b—o—n—e——m—a—r—r—o—w——m——e—s—e—n—c—h—y—m——a—l—s—l—e—m．—c—e—1．1s，—c．o—m——b—in——e—d—w——it—h——s—il—k——fi．b．r．o．i．n．．in——v—i—tr—o—．a—n—d——v—i—v、o————．．—A．b—s—t—r—a—c—tExperimentalstudyonbonemarrowmesenchymalstemcellscombinedwithsilkfibroininvitroandvivoAb

4、stractobjectiveThroughobservingtheimpactofporesizeofsilkfibron(SF)Onthegrowthandproliferationofbonemallowmesenchymalstemeells(BMSCs)invitro，andOnrepairingofbonedefectsinviVO，elementarilyassessitssuitableporesizeinbonetissueengineering．andtheclinicalsignificanceofSFthatserveasoneextracellulatmatri

5、xmaterial．MethodsWjestablishedthemodelofcultivationandproliferationofBMSCsinvitro．andcollected斓uentcellstoseedinthreedifierentporesizeofporousSFwhichwereSF．I(SFwith58ttmporesize)．SF．II(SFwith78ttmPOresize)andSF．III(SFwithllIpmporesize)invitro．ThenWCcarriedouttwopartsofexperiments．Inpartone．wecont

6、inuouslyculturedtheBMSCs／SFcompositeinvitro，inparttwo，transplantedthecompositeinVivotOcurel5mmlongmetaphysealradiusdefeCtSof24NewZealandwhiterabbitSofwhich8defects(groupA)weretreatedwitllBMSC“SF．Icomposites．8(groupB)weretreated谢也BMSCs，SF-H，andtheother8rabbits(groupC)wereimplantedwitllBMSC“SF—III．

7、Aseriesofexaminationsincludingradiograph．histomorphology,invertmicroscope，s

8、c抛m蛔electronmicroscopc(SEM)andlaserscanconfocalmicroscope(LSCM)werecarriedouttoanalyzetheexperimentalphenomenon．Resuitswehadsuccessfullyestabl