慢性氟中毒大鼠肝组织中pi3k-akt1相关蛋白及其mrna的表达及意义

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1、中图分类号：R363单位代码：10660UDC：616学号：10660S120187学科专业代码：100104密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）慢性氟中毒大鼠肝组织中PI3K-Akt1相关蛋白及其mRNA的表达及意义ExpressionofProteinandmRNAassociatedwithPBK-AktlandTheirSignificanceinRatsLiverTissueswithChronicFluorosis研究生：范彬导师：于燕^尼教授年级：2012级专业：病理学与病理生

2、理学二〇一五年五月贵阳医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进汙氐究工痄系取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何冥匕1、人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体.均己在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究己发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名（手写）：导师签名（手写）：w/r年r月Wtz]>>/I年/月日学位论文版权使用授权书本学位

3、论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“V”）：1、保密□，在__霉解密后适用本授权书。2、不保密t/v。作者签名（手写）：访托导师签名（手写）：、f中图分类号：R363单位代码：10660UDC：616学号：10660S120187学科专业代码：100

4、104密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）慢性氟中毒大鼠肝组织中PI3K-Akt1相关蛋白及其mRNA的表达及意义ExpressionofProteinandmRNAassociatedwithPI3K-Akt1andTheirSignificanceinRatsLiverTissueswithChronicFluorosis论文作者：范彬指导教师：于燕妮教授申请学位：医学硕士培养单位：临床医学院学科专业：病理学与病理生理学研究方向：分子病理研究起止日期：2012年9月至2015年6月论文评

5、阅人：盲评答辩委员会主席：郑洪教授论文答辩日期：2015年5月23日二〇一五年三月慢性氟中毒大鼠肝组织中PI3K-Akt1相关蛋白及其mRNA的表达及意义专业：病理学与病理生理学硕士研究生：范彬导师：于燕妮【摘要】目的：研究PI3K信号通路在氟中毒大鼠肝脏组织中表达以及LY294002抑制PI3K信号通路的影响，探讨PI3K信号通路对氟中毒大鼠肝脏损伤的作用机制及意义。方法:SD大鼠48只，按体重随机分4组，每组12只，对照组：常规饲料（实验动物中心提供玉米含氟量为1.6mg/kg，饲料中含氟量为1.5mg/

6、kg）；氟中毒组：饲以取自病区的玉米用前加配料并加工制成条状喂养（加工后的含氟量为10mg/kg）；阻断剂组：氟中毒大鼠饲料同前，处死动物前1周尾静脉注射阻断剂LY294002，持续三周；阻断对照组：氟中毒大鼠饲料同前，处死动物前1周尾静脉注射阻断剂稀释液PBS。观察大鼠氟斑牙的发生情况，氟离子电极法检测尿氟、骨氟含量；自动血生化分析仪检测大鼠肝功能；光镜观察肝组织病理形态学改变；免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）、Westernblot和实时荧光定量PCR（Real-timef

7、luorescentquantitativePCR，RT-PCR）分别检测肝组织中PI3K、Akt1蛋白及其mRNA的表达；流式细胞术测定肝组织细胞凋亡及胞内钙离子浓度。结果：1、氟中毒组、阻断对照组氟斑牙的发生率增加，且骨氟、尿氟的含量较对照组明显增高（（P＜0.05）），而阻断剂组大鼠骨氟、尿氟含量较对照组的差异不明显，表明慢性氟中毒动物模型建立成功。2、与正常对照组相比，氟中毒组和阻断对照组中ALT和AST活性升高，而TP和ALB活性降低；而与阻断组相比较，氟中毒组和阻断剂对照组ALT和AST活性降低，

8、而TP和ALB活性升高。表明氟中毒大鼠肝脏功能有损伤。病理形态学观察发现氟中毒大鼠肝脏损伤不明显。3、与对照组相比，氟中毒组、阻断剂对照组肝组织中PI3K、Akt1蛋白及其mRNA的表达升高，阻断组与氟中毒组、阻断剂对照组比较，其表达均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。4、氟中毒大鼠肝细胞凋亡细胞个数比对照组及阻断剂组增多；阻断剂组凋亡细胞较正常对照组略微增多；氟中毒组与阻断对照组无明显差异。