慢性氟中毒大鼠骨组织sparc、mmp-9基因表达的意义研究

《慢性氟中毒大鼠骨组织sparc、mmp-9基因表达的意义研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、贵阳医学院2013届硕士研究生论文《中国图书资料分类法》单位代码：10660分类号：R363.2+1学号：S100080贵阳医学院2013届硕士学位论文慢性氟中毒大鼠骨组织SPARC、MMP-9基因表达的意义研究姓名：贾志红导师：于燕妮教授年级：2010级专业：病理学与病理生理学2013年2月28日贵阳医学院2013届硕士研究生论文目录摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„2前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„4材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„6结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„17

2、讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„22结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„28参考文献„„„„„„„„„„„„„„„„„„29英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„32在读期间参与课题及发表文章„„„„„„„„„34致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„35缩略词表„„„„„„„„„„„„„„„„„„36论文原创性声明„„„„„„„„„„„„„„„37附：综述„„„„„„„„„„„„„„„„„38-1-贵阳医学院2013届硕士研究生论文慢性氟中毒大鼠骨组织SPARC、MMP-9基因表达

3、的意义研究专业：病理学与病理生理学姓名：贾志红导师：于燕妮教授摘要目的观察慢性氟中毒大鼠骨组织的形态学改变和检测骨组织中SPARC和MMP-9mRNA及其蛋白的表达变化，为氟中毒骨骼损伤的早期预防和控制提供科学依据。方法36只SD大鼠按体重、性别随机分3组，每组12只，组内雌雄各半。对照组(饮水含氟量＜1mg／L)、低氟组(饮水加氟量5mg／L)、高氟组(饮水加氟量50mg／L)。饲养大鼠8个月，观察氟斑牙发生情况及测定尿氟含量，明确氟中毒模型建立成功后股动脉放血处死大鼠，氟离子电极法测各组大鼠尿氟、骨氟含量

4、；收集血清，用酶联免疫吸附法（Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay,ELISA）检测大鼠血清中骨碱性磷酸酶（BoneAlkalinePhosphatase,BALP）和抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrate-ResistantAcidPhosphataseform5b,TRACP5b）的含量；苏木素-伊红(HematoxylinandEosin,HE)染色后光镜下观察股骨下段骨组织形态学改变并进行骨组织形态计量学测量；免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）和

5、原位杂交技术(In-situhybridization,ISH)分别检测骨组织中的SPARC和MMP-9的蛋白及其mRNA表达水平。结果1、慢性氟中毒大鼠模型复制成功，表现为染氟组大鼠出现不同程度氟斑牙损害，高氟组最为严重，对照组未出现氟斑牙，各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组比较，实验组尿氟、骨氟含量随氟浓度的增加而逐渐升高，各组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2、染氟组大鼠血清BALP含量均增高，各组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）；血清TRACP5b含量在染氟组均增加，

6、与对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。3、染氟组大鼠骨组织呈骨皮质增厚、骨小梁增宽、骨髓腔间隙变窄等骨质硬化表现。与对照组比较，染氟组大鼠的骨皮质厚度、骨小梁宽度、骨髓腔间隙及骨小梁密度差异均有统计学意义（P<0.05），随氟浓度增加，差异更明显。-2-贵阳医学院2013届硕士研究生论文4、与对照组比较，染氟组大鼠骨组织成骨细胞中SPARCmRNA及其蛋白表达水平逐渐增高，各组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）；5、与对照组比较，染氟组大鼠骨组织破骨细胞中MMP-9mRNA及其蛋白表达水平随氟

7、浓度的增加而升高，各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.慢性饮水型氟中毒大鼠模型复制成功，染氟组大鼠出现骨代谢紊乱，成骨活跃和破骨增强，骨转换加速，但随氟浓度的增加成骨作用更明显，表现为骨硬化型骨损伤。2.SPARC在骨代谢异常中表达水平升高，推测过量氟可通过上调成骨细胞中SPARC蛋白和mRNA的表达来调节成骨细胞的增殖、分化过程，从而促进骨形成。3.MMP-9的表达水平增高，推测与过量氟上调大鼠骨组织破骨细胞中MMP-9的表达来促进骨吸收过程有关。【关键词】慢性氟中毒；成骨细胞；破骨细胞；S

8、PARC；MMP-9-3-贵阳医学院2013届硕士研究生论文前言氟(Fluorine，F)属于卤族元素，在自然界极少单独存在，多以氟化物的形式存在于岩石、土壤、水、植物、动物、空气中，人和动物可以从多种途径摄入氟。氟是人体必需微量元素之一，每日约需1.0-1.5mg，而摄入机体的约90%在骨内沉积，主要被骨骼和牙齿贮留。适量氟可促进钙磷沉积、利于骨的钙化、增强骨的硬度和强度及预防龋齿等作用。但过量氟