资源描述：
《食管癌组织中s期激酶相关蛋白2mrna的表达意义论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、食管癌组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达意义论文孙永刚，彭贵勇，肖天利，唐郡，李向红，罗元辉，廖化禹【关键词】食管肿瘤SignificanceofSphasekinaseassociatedprotein2mRNAexpressioninesophagealcarcinoma【Abstract】AIM:ToexploretheSphasekinaseassociatedprotein2mRNAexpressionanditsrelationshipRNAinesophagealcarcinomatissuesanditscorrespondingadjacenttissuesRN
2、AexpressioninesophagealcarcinomaRNAa,butnotcorrelatedorsize,andlymphnodemetastasis.CONCLUSION:IncreasedSkp2mRNAexpressioncontributestothecarcinogenesisandprogressofesophagealcarcinoma,ayprovidesomenea.【Keyerasechainreaction;esophagealneoplasms【摘要】目的：探讨S期激酶相关蛋白2mRNA在食管癌及其癌旁组织中的表达及其与食管癌临床病理特征的关系.
3、方法：采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测S期激酶相关蛋白2mRNA在45例手术切除的食管癌组织及癌旁组织中的表达.结果：S期激酶相关蛋白2mRNA表达率在食管癌中为66.6%(30/45),而癌旁组织中为24.4%(11/45),差异有显著性(P0.05).S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小、及有无淋巴结转移无关,与肿瘤分化程度及TNM分期有关(P0.05).结论:S期激酶相关蛋白2的高水平表达促进了食管癌的发生发展.并将可能为食管癌的早期诊断和治疗提供新的手段.【关键词】S期激酶相关蛋白质类;逆转录聚合酶链反应；食管肿瘤0引言我国是食管癌高发区,
4、在我国居恶性肿瘤的第四位［1］.Skp2(Sphasekinaseassociatedprotein2)是新发现的SCF（Skp1CullinFbox)多功能E3酶复合体中的一种Fbox蛋白，参与细胞增殖与调亡的调控.freelRNA表达,探讨其与食管癌临床病理参数之间的关系.1材料和方法1.1材料45例食管癌来自第三军医大学第一附属医院(2004～2005)手术标本，由西南医院病理科经病理证实为食管癌，全部病例术前均未作化疗、放疗;其中男28例,女17例.年龄25～70（平均50.2）岁.取癌组织及手术切缘组织,.freelarkerⅠ(北京天为时代).紫外分光光度计(DU640型
5、,美国),PCR扩增仪(2700型,PE公司,美国).ZF90型多功能暗箱式紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂),凝胶成像仪(BioRad公司,美国).1.2方法采用TriPure一步法提取组织总RNA,操作方法按试剂说明进行.将提取的总RNA用DEPC处理过的去离子水重悬RNA颗粒,紫外分光光度计(BioRad)下进行核酸定量.RTPCR检测食管癌及癌旁组织中S期激酶相关蛋白2mRNA的表达采用两步法试剂盒(博大泰克公司).S期激酶相关蛋白2与βactin引物序列根据电脑软件Primer5.0版设计,其上游序列:5′ACCTTTCTGGGTGTTCTGGATT3′;下游序列:5′GAT
6、AGGTGTTGGAGGTAGTTGAGC3′.PCR产物片段为316bp.以βactin为内参照,其上游引物序列:5′GAAACTACCTTCAACTCCATC3′;下游引物序列:5′CATCTCTTGCTCGAAGTC3′.PCR产物片段为502bp.RTPCR的操作步骤参照试剂盒说明进行.先将以上所提取的总RNA反转录成cDNA.PCR扩增反应:取2μL反转录cDNAPCR扩增,反应体积为50μL,并按以下参数在PCR扩增仪(2700型,PE公司,美国)上进行:94℃预变性5min,94℃变性50s,53℃退火50s,72℃延伸2min,40个循环;72℃最终延伸8min,4℃
7、贮存备用.取5μLPCR产物经20g/L琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色后,紫外透射仪下观察结果,并在凝胶成像仪上照相.以PCRMaker为标准,在316bp位置出现条带为Skp2表达阳性.而βactin在502bp位置上出现条带为表达阳性.统计学处理:采用SPSS10.0软件进行χ2检验分析.P0.05认为差异有统计学意义.2结果2.1S期激酶相关蛋白2mRNA的检出率45患者中有30例食管癌组织S期激酶相关蛋白2mRNA阳性表达,总阳性率为66.6%.癌旁
