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1、分类号学号MZ1251QUDC密级壤?义葦叫YANGZHOUUNIVERSITY硕壬学位冷文(专业型)P民P对RA-FLS细胞迂移和侵袭的影响巫Ann^Ann-.广:指导教师姓名:张育教授,扬州大学,江苏扬州,225001申请学位级别:硕壬学科专业名称:内科学(风湿免疫)1论文提交日期:2015年05月9曰:2015年04月10日论文答辩日期学位授予单位:扬州大学学位授予日期:2015年06月30曰答辩委员会主席:刘延庆教授2014年06月-严娜姗:PRP对RA化S细胞迁移
2、和仅袭的影响1PRP对RA-FLS细胞迂移和侵袭的影响中文摘要研究背景和目的:一atet-PRP)富血小板血浆(pllerkhplasma,是种含有大量血小板和各种生长因子的自体血浆,PRP,。当PPR被凝血酶、氯化巧激活后中的a颗粒经脱颗粒的方式释放出大量(Pateet-erivedrowtctor,PD)、的生长因子,包括血小板衍生生长因子lldghfaGF转化生长化拉--、化因子(Trans化rmingrowctor3,TGF3)血管内皮生长因了(Vascularendoelialgrow化g((fac
3、torVEGF)和族岛素样生长因子(虹sulinJikerowthfactor,IGF)等,而这些生长因,g子在细胞的増殖、分化、骨质产生、软组织愈合和胶原合成等方面起着重要的作用。一类风湿关节炎(Rheumatoidarthritis,RA)是类W炎性细胞浸润和滑膜增生为特点,。(Fibrobt-e最终导致关节的破坏和崎形的慢性自身免疫性疾病滑膜样成纤维细胞laslikvd民A-FLSsynoialcls,FLS在民A的发生和发展过程中起着重要的作用,能够粘附细胞外)基质,分泌金属基质蛋白酶,迁移,、侵袭至关节软骨造成关节的
4、破坏。有研究报道血小-板数目的增多和民A的疾病活动度相关,本文在主要目的是探讨PRP对RAFLS迁移和侵袭的影响。方法:1.PRP,离必利用凝血酶和氯化巧活化后取上清用于实验;2民A-.利用划痕实验、transwell细胞迁移和侵袭实验研究PRP对FLS细胞迁移和侵袭的影响;--3.利用RAFLS与I型胶原粘附实验研究PRP对RAFLS与细胞外基质extracel山lar(matrixECM)粘附的影响;,4-.利用免疫巧光实验观察PRP对RAFLS细胞肌动蛋白细胞巧架重排、丝状和片状伪足形成的影响;-5-.利用RT
5、qPC民检测PRP作用后RAFLS细胞中MMPs的mRNA的表达。结果:1PRPRA-FLST.划痕实验显示能够促进细胞的迁移ranswell;细胞迁移实验结果显示,相较于NC组,2%PRP和5%P民P组穿过小室的相对细胞数分别为2.0化0.78,25.(戶<05。.化090.0)2.Transwell细胞侵袭实验结果显示,相较于NC细,2%PRP和5%PRP组的细胞穿扬州大学硕±学位论文2越Matrigel屏障的相对细胞数分别为1.5化0.22,2.68±0.35(P<0.05)。3RA-FLS2%PRP.细
6、胞与I型胶原粘附实验显示,相较于NC组,PRP和5%组的细胞描附于I型胶原的相对细胞数分别为1.50±0.27,1.87±0.62巧<0.05)。4-.免疫巧光实验结果显示,PRP能够促进RAFLS细胞骨架的重排,板状伪足和丝状伪足增多,张力纤维减少。-----mRNA5.RT巧C民显示PRP能够促进RAFLS上调MMP1、MMP3、MMP10的的表达。结论;PRA-1、.PR促进FLS细胞的迁移侵袭和粘附;-FLS细胞--2、、.PRP可能通过调控RA肌动蛋白骨架纤维的重排上调MMP1MMP3-lO
7、mRNA的表达来实现其促进迁移和MMP、侵袭和黏附作用的;关键词:富血小板血浆;类风湿关节炎滑膜成纤维细胞;迂移;侵袭;-严姗姗;PRP对RAFLS细胞迁移和侵袭的影响呈Effects-ofPRPonmirationandinvasionof化eRAFLSgAbstract:BackroundandObective:gjaee-tPltltrichplasma(PRP)is化ebloodplasma化athasbeenenrichedwi化plaelets.PRP,activate
8、db10%calciumchlo
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