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《神经肽cgrp、sp、npy对人oa软骨细胞的影响研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、硕士学位论文神经肽CGRP�SP�NPY对人OA软骨细胞的影响研究TheeffectionofNeuropeptideCGRP，SPandNPYtoHumanOsteoarthriticChondrocyteCell作者夏先学导师騎艾二〇一五年五月川北医学院硕士研究生学位论文原创性声明本人郑取声明：所呈交的论文是本人在导师的指4下独立进行研究所収得的研究成果。除了文中特别加以标注‘；)I用的内容外，本论文不包含任何其他个人成集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和粜体，均已在文屮以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确斤式规定外，本研究已发表与未发表成果的知识产权
2、均归属川北医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名Flf年^/J川北医学院硕士研究生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定’同意学校保留并向国家打关部门或机构送交论文的复印件和屯子版’允许论文被杏阅和借阅。本人授权川北医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采影印、缩印或扫描等M制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“V")：保密口，在年解密后适用本授权书。不保密作游签名丨丨期^年；月八円中图分类号:R68学校代码10634UDC617密级授予单位川北医学院神经肽CGRP、SP、NP
3、Y对人OA软骨细胞的影响研究TheeffectionofNeuropeptideCGRP,SPandNPYtoHumanOsteoarthriticChondrocyteCell作者夏先学导师蔚芃培养院系临床医学系授位类别科学学位授位级别硕士学科门类医学学科专业外科学研究方向骨与关节基础与临床年级2012级学号201203097二○一五年五月致谢时光飞逝,日月如梭,在川北医学院三年的硕士学习生活即将结束。在论文成稿之际,特向给予我关怀、帮助的师长、同学、朋友及家人表达我最诚挚的敬意和感谢!首先,衷心地感谢我尊敬的导师蔚芃教授三年来在临床、科研中对我的悉心指导及生活中给予我无微不至的关怀!导
4、师渊博的学识、严谨求实的工作作风时刻感染者我!您严谨的治学态度、高尚的医德医风、对事业忘我和精益求精的精神,独特的人格魅力是我一生学习的榜样!是您带领我在骨科这个神圣而伟大的医学殿堂里航行,并使我在川北医学院附属医院骨科迈出了坚实的第一步!师恩似海,今生难忘!衷心感谢蒋成教授、张志明副教授、吴青副教授、明伟副教授、宋超敏副教授、何江涛副教授、陈路副教授、蒲劲松博士在临床实践与科研中给予的具体指导和无私的帮助!老师们将毕生的精力奉献在川北医学院骨科这一片热土,为我们创造了良好的学术氛围。他们的渊博学识让我开阔了视野,增长了见识!衷心感谢川北医学院骨科全体老师及全体护理工作人员在三年学习中给予
5、我的指导和帮助!衷心感谢川北医学院骨科师兄弟的帮助!衷心感谢我的妻子及家人一直以来对我学习、生活上的支持与精神上的鼓励!让我在医学这条道路上勇攀高峰!衷心感谢骨科12级硕士同学,我们互相学习,互相鼓励,互相帮助,共同度过人生中最难忘的三年时光!神经肽CGRP、SP、NPY对人OA软骨细胞的影响研究摘要目的：利用神经肽CGRP、SP、NPY干预体外培养人OA软骨细胞，同时检测MMP-l、MMP-3、MMP-13的分泌。探索神经肽CGRP、SP、NPY对人OA软骨细胞增殖的同时是否抑制MMP-l、MMP-3、MMP-13的分泌。为探讨神经肽增殖软骨细胞，寻找OA的药物治疗提供理论基础。方法：1
6、、采用II型胶原酶消化法处理人膝关节软骨标本从而取得大量高纯度的OA软骨细胞,采用II型胶原免疫组化法对所取得的OA软骨细胞进行鉴定,甲苯胺蓝染色法检测OA软骨细胞的存活率。2、分为实验组和对照组，分别用神经肽CGRP、SP、NPY对OA软骨细胞进行干预，对照组用等量PBS处理。采用MTT法检测各组细胞的增殖并绘制曲线。3、Ki67免疫法检测细胞增殖率。4、采用WestenBlot检测细胞MMP-l、MMP-3、MMP-13的表达。结果：1、OA软骨细胞体外培养后呈三角或多角等不规则形状,向四周爬行生长,并且前三代细胞基本上能较好的保持原有的细胞表型、形态及功能。2、在所测定的时间点内（3
7、d、5d、7d）所测得的增殖神经肽CGRP、SP、NPY对OA软骨细胞均有增殖作用，其中20μmCGRP在第5天增殖达最高峰（1.048±0.181）；20μmSP在第5天增殖达最高峰（1.132±.0537）；50μmNPY第5天增殖达最高峰（0.806±0.115）。各组在所测定的时间点内（3d、5d、7d）均较空白组（P＜0.001），差异显著。3、ki67免疫组化示软骨细胞呈椭圆形、梭形、多角形或者不规则形；棕色
