eos蛋白在红系和巨核系分化中的功能研究

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1、单位代码：１０４７２学术学位回专业学位口１２１民３４学号；２００３中图分类号；密级：婆怒硕±学位论文Ｅｏｓ蛋白在红系和巨核系分化中的功能研究ＳｔｕｄｏｎｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＥｏｓｒｏｔｅｉｎｉｎｅｒｔｈｒｏｄａｎｄｙｐｙｍｅａｋａｒｏｃｔｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｇｙｙ作者姓名：隋娟导师姓名：李平法于海川学科口类；临床医学专业名称：临床检验诊断学培养院系；医学检验学院—完成时间；二０五年Ｈ月Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｆｉｍｃｔｉｏ凸ｏｆｔｈｅＥｏｓｒｏｔｅ

2、ｉｎｉｎｅｒｔｈｒｏｄａｎｄｐｙｍｅｇａｋａｒｙｏｃｙｔｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｇＣａｎｄｉｄａｔｅ；ＳｕｉＪｕａｎＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＬｉＰｉｎｇｆａＹｕＨａｉｃｈｕａｎＳｃｈｏｏｌｏｆｌａｂｏｒａｔｏｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅＸｉｎｘｉａｎＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ标注引用的内容

3、外，本论文不包舍任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重耍贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名；祷述日期：２。／玉年与月＞日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留，、使用学位论文的规定同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。＂＂本学位论文属于Ｖ）：（请在Ｗ下相应

4、方框内打１．保密□，在年解密后适用本授权书。＿＿２．不保密作者签名如年■：爲銷日期：）＾月日ｆ导师签名：店日期：年／月疋ｆａ翁目录摘要（１）Ａｂｓｔｒａｃｔ（３）前胃（６）实验材料与主要试剂（８）实验方法（１４）实验结果（２７）職（３６）结论（３９）参考文献（４０）综述：调控因子在巨核细胞分化中的作用（４４）附录（６３）攻读学位期间发表文章情况（６４）（６５）个人简历（６６）新乡医学院硕壬学位论文Ｅｏｓ蛋白在幻：系和巨核系分化中的功能研究摘要化里

5、目泉造血分化是生物体内重要的生理过程，不仅涉及造血干细胞（ＨｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓＨＳＣ，还，）的自我更新、各链系祖细胞的定向分化包括祖细胞向成熟血细胞分化一和发育的全过程。红系分化和巨核系分化是造血分化的重要分支，也是贯穿人生的重要生理过程。转录因子Ｅｏｓ也叫ＩＫＺＦ４ｉｋａｒｏｓｆａｍｉｌｚｉｎｃｆｉｎｅｒ４，是鲜指蛋白转（ｙｇ）ａ一录因子ｉｋｒｏｓ家族中的员。作为负性调节因子可Ｗ参与许多基因的表达调控。有研究表明，Ｅｏｓ也参与了造血过程中纪系的分化，但作用机制还不清楚。而关于Ｅｏｓ在巨核系分化中的作用及其

6、机制知之更少。目的分析转录因子Ｅｏ，并初步探讨其调控机制。ｓ在红系和巨核系分化中的作用方法１．细胞培养：将生长状态良好的Ｋ５６２细胞分为红系诱导组和巨核系诱导组进行传代培养。前者传至４个中号培养皿中，分别标记为化、１２ｈ、２他、４化４个时间段，５０ｉ６皿中加入＾Ｍ氯化高铁血红素巧６１１１１１１）。后者传至个中号培养，分别标记为化、°１５０ＰＭＡ化、２４ｈ、４化、７化、９６ｈ６，Ｍ佛波醋。３７Ｃ、５％二，个时间段加入ｐ（）在氧化碳培养箱中培养，诱导Ｋ５６２细胞分别向红系和巨核系分化。２－．１ｍ离也５联苯胺染色与瑞氏姬姆萨染色：收集各组细胞

7、，０００ｒｐｍｉｎ，收集沉淀，用胎牛血清重悬，涂片染色，镜下观察细胞的形态变化。３．流式细胞检测：收集各培养组细胞，检测诱导前后细胞分化相关表面标志物ＣＤ４１ａ、ＣＤ６１、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ７１的表达情况。４ａｌ－ｔｉｍｅＲ检测ＡＡ的ＰＣ，检Ｅｏ．Ｒｅ：收集细胞，提取ＲＮ测诱导后ｓｍＲＮ表达量。５．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ蛋白检视；，裂，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检Ｉ收集各培养组细胞解后提取蛋白－测诱导前后转录因子Ｅｏｓ和红系特异转录因子ＧＡＴＡ１蛋白的表达情况。结果１新乡医学院硕