紫杉醇诱导人乳腺癌mcf-7细胞凋亡的fasfasl信号通路研究

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1、Y976108国内图书分类号国际图书分类号学位论文密级:编号:309347紫杉醇诱导人乳腺癌MOF-7细胞凋亡的Fas/FasL信号通路研究袁丽丽导师姓名:严云勤教授申请学位级别:理学硕士专业名称:发育生物学论文提交日期:2006年4月17日答辩日期:2006年6月14日所在单位:生命科学学院学位授予单位:东北农业大学学位授予日期:答辩委员会主席:孙效文研究员2006年6月20曰摘要乳腺癌是我国女性常见的一种恶性肿瘤,其死亡率仅次于肺癌而位居第二位,且发病率呈直线上升趋势。近日中国抗癌协会公布了最新统计数据,中国妇女乳腺癌死亡率正以3%的速度增长,乳腺癌成为

2、女性健康的头号杀手。紫杉醇是乳腺癌化疗中最具活性的药物之一,单药和联合用药均显示很好的疗效。紫杉醇已应用于乳腺癌的临床治疗,一般认为紫杉醇能增强微管聚合,稳定微管防止解聚,使有丝分裂停滞在G2/M期,从而阻断正常的有丝分裂和细胞增殖;除此之外,紫杉醇可以直接在细胞信号和基因表达上发挥作州,活化多种凋亡相关基因的表达,从而引发细胞凋亡。但紫杉醇诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制还不十分清楚,而且它作用于不同类型细胞机制也有所不同。本实验采用体外培养的乳腺癌MCF-7细胞,经不同时间和不同浓度的紫杉醇处理后,通过DNA梯度电泳检测细胞的凋亡情况;应用RT-PCR和免疫蛋

3、白印迹的方法检测Fas/FasL信号通路中凋亡相关基因的mRNA和蛋白的表达变化。探讨紫杉醇诱导乳腺癌MCF一7细胞凋亡与Fas/FasL信号通路的关系,为进一步阐明紫杉醇诱导乳腺癌细胞凋亡分子机理提供实验依据。实验结果:1、DNA凝胶电泳结果显示,紫杉醇可以诱导MCF一7细胞发生凋亡,并且随着时问推移和药物浓度的增加凋亡加剧,提示紫杉醇诱导MCF.7细胞凋亡具有明显的时间剂量依赖性。2、RT.PCR结果显示:在MCF.7细胞中,随紫杉醇浓度的增加Fas、FasL、FADD、Caspase·8、Caspase.10、Caspase一3基因mRNA水平有所上调

4、,DR4、DR5mRNA水平随药物浓度的增加没有发生明显的变化。3、Westem.blot结果显示:随着紫杉醇浓度的增加,Fas、FasL蛋白表达量逐渐增加,Caspase·8、Caspase.3酶原蛋白表达量逐渐减少。通过以上结果可以推断紫杉醇诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡与Fas/FasL信号通路有关而DR4、DR5并没有参与这一过程。关键词:紫杉醇:MCF.7;细胞;Fas/FasL通路VStudyofTaxolInducedApoptosisinBreastCancerMCF-7CellsViaFas/FasLPathwayAbstractBreas

5、tcancerisakindofmalignanttumourandiscommoninfemalejnourcountry.Itsmortalityissecondlytolungcancer,andincidencesofbreastcancerhaveatrendofrisingstraightly.ThelatestdatafromChinaAnticancerAssociation.whichindicatethemoralityofwomenbreastcancerinChinaisraisingby3percent,breastcancerha

6、sbecamethefirstkilleroffemalehealth.Taxolisoneofthemosteffectivetreatingbreastcancermedicines,singleorcombinewithothermedicinealsoshowwellcurativeeffect.Tax01havebeenusedinclinictherapyofbreastcancer.Generallyspeaking,taxolcanacceleratethe-assembleofmicrotubule,stabilizemicrotubule

7、fromitsdiscomposing,makemitosisstagnateatG2/M,sequentiallyinterdictthenormalmitosisandproliferationofcells,inducecellapoptosis;Besides,adirectfunctionoftaxoloncellsignalandgeneexpression,activationsofapoptosisgenesandexpressionofproteinscaninduceapoptosis.However,themolecularmechan

8、ismoftaxolinducetumoureell

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