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时间:2019-03-05
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1、替普瑞酮对大鼠视网膜兴奋性损伤的保护作用摘要目的:通过玻璃体腔注射NMDA制作大鼠视网膜兴奋性损伤模型,观察替普瑞酮对视网膜HSP70表达的影响,并观察其对兴奋性损伤视网膜神经节细胞有无保护作用。方法:Wistar大鼠50只按随机原则分为4组,包括正常组(5只)、空白对照组(15只)和实验组(替普瑞酮腹腔注射组,30只),实验组按照注射药量不同分为低剂量组(15只)和高剂量组(15只)。正常组大鼠不做任何处理,实验组大鼠腹腔注射替普瑞酮(200mg/Kg、800mg/Kg),空白对照组注射等量溶剂,注射药物后1h空白对照组和实验组大
2、鼠均随机取一眼玻璃体腔注射2u180mmol/1NMDA并做好标记。并于造模后3h随机处死相同数量的大鼠(各10只),用于检测HSP70的表达,24h处死相同数量的大鼠(各5只),观察RGCs的变化。同时正常对照组在1h时全部处死。免疫组织化学染色方法和实时荧光定量RT-PCR分析各组视网膜HSP70的表达,甲苯胺蓝染色计数各组视网膜神经节细胞数目。结果:HE染色显示正常组大鼠视网膜组织结构完整,细胞形态规则,染色清晰。空白对照组与低剂量组大鼠视网膜神经节细胞数目较正常大鼠明显减少,细胞排列不规则,视网膜内层萎缩,视网膜整体变薄。高
3、剂量组大鼠视网膜损伤较空白对照组明显减轻。实时荧光定量RT—PCR结果显示,在正常组和空白对照组大鼠视网膜中只有微量的HSP70表达,低剂量组HSP70mRNA表达量较正常对照组稍有增加,高剂量组HSP70mRNA表达量明显增加。免疫组织化学染色显示替普瑞酮能诱导HSP70在整个视网膜显著表达,而正常组及空白对照组只见微量的HSP70棕黄色颗粒沉积于视网膜外层。免疫组织化学染色IOD值测定结果与荧光定量PCR结果相吻合。甲苯胺蓝染色显示正常组视网膜神经节细胞排列整齐,尼氏体染色清晰,空白对照组神经节细胞数目明显减少,尼氏体减少甚至消
4、失,低剂量组无明显改善,高剂量组神经节细胞损伤明显减轻。结论:1.成功建立大鼠视网膜兴奋性损伤模型;2.腹腔注射高剂量替普瑞酮后,可在较短时间内诱导大鼠兴奋性损伤视网膜大量表达HSP70,并发挥保护神经节细胞免受兴奋性损伤的作用。硕士研究生:邢业娇(眼科学)指导老师:王大博教授关键词:替普瑞酮;热休克蛋白70;N-甲基-D一天门冬氨酸;青光眼TheprotectionofratretinaagainstexcitotoxicitymjurYbYgeranylgeranylacetoneAbstractPURPoSE.Toobserv
5、etheefiectsofgeranylgeranylacetone(GGA)ontheexpressionofHSP70andprotectionofretinalganglioncellintherat‘sretinaexcitatoryinducedbyN—methyl-D·aspartate.METHODS.50Wistarratswererandomlydividedinto4groups,includingnormalgroup(’ratsl,thecontrolgroup(15rats),andtheexperimen
6、talgroup(GGAintraperitoneal1nJectlongroup。n:30),theexperimentalgroupinaccordancewiththeinjectiondosedividedintolow-dosegroup(15rats)andhighdosegroup(15rats).TheratsofnormaIcontrolgroupreceivednotreatment.TheexperimentalratswereintraperitonealinjectedofGGA(200mg/kg,800m
7、g/kg),theratsinblankgroupwereintraperitonealinje。‘ionofthe8ameamountofsolvent.After1hour,theratsinexperimentalgroupandcontrolgroupwereintravtrealiniectedwith29lNMDAconcentrationof80nmol/1intoone。Ye。andomlY·Alte。modeling3hours,10ratswerekilledrandomlytodetecttheexpressi
8、onofHSP70·Aft。。24hours.5ratswerekilledtoobservethechangesinRGCs.Theratsinnormalcontrolgroupweresacrificedatlh.Immunoh
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