谷氨酰胺对大鼠视网膜兴奋性损伤的保护作用

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1、摘要目的：研究腹腔注射谷氨酰胺对大鼠视网膜兴奋性损伤中Bm3a表达的影响。方法：健康清洁型Wistar大鼠55只随机分为三组，正常对照组5只，实验对照组25只、实验组25只。正常对照组不做任何处理，实验对照组和实验组中所有大鼠玻璃体腔注射2gl80mmol／1NMDA制作视网膜兴奋性损伤模型，实验组在大鼠视网膜兴奋性损伤模型制作7h后腹腔注射谷氨酰胺(0．75g／kg)。实验组及实验对照组分别在造模后8h、12h、16h、24h、48h各随机处死5只大鼠，正常对照组大鼠在不同时间点随机处死一只。HE染色光镜下观察各组视网膜组织的形态学变化，免疫组织化学染色及实时荧光定量RT-PCR方法检测视网

2、膜Bm3a表达的变化。结果：HE染色显示正常对照组大鼠视网膜组织结构层次清楚，染色均匀，细胞形态规则。实验各组大鼠视网膜神经节细胞排列紊乱，胞浆内空泡样变性，视网膜组织变薄，随时间延长神经节细胞数目逐渐减少。实时荧光定量RT-PCR结果显示实验各组Bm3amRNA均较正常组减少；造模后12h、16h、24h、48h，实验组Bm3amRNA均高于实验对照组，差异均有统计学意义；造模后8h，实验组与实验对照组Bm3amRNA差异无统计学意义。免疫组织化学染色结果显示Bm3a只在视网膜神经节细胞层表达，阳性细胞计数及光密度值测定结果与实时荧光定量PCR结果相吻合。结论：1．成功建立大鼠视网膜兴奋性损

3、伤模型；2．NMDA可致大鼠视网膜中Bm3a及其mRNA表达减少；3．腹腔注射谷氨酰胺可增加大鼠兴奋性损伤视网膜中Bm3a的表达，提高神经节细胞的存活率。硕士研究生：纪珍(眼科学)指导老师：王大博教授关键词：谷氨酰胺；视网膜；N一甲基天冬氨酸；Brn3aGlutamineProtectsRetinaFollowingExcitotocityInjuryinRatAbstractObjeetiveToobservetheeffectofglutamineonBm3aexpressioninretinaafterNMDA烈一methyl—D-aspartate)excitotocityinjury

4、inrat．MethodsFifty-fiveadultcleanWistarratswererandomlydividedintothreegroups：normalcontrolgroupincludingfiverats，experimentalcontrolgroupincludingtwenty—fiveratsthatweretreatedwithNMDA(2p1，80mmol／1)byintravitrealinjection，experimentalcontrolincludingtwenty-fiveratswhichweretreatedwithglutamine(0．75

5、9／kg)byintraperitonealinjectionsevenhoursafterNMDAinjected．Randomlychoosedfiveratsofexperimentalcontrolgroupandexperimentalgroupweresacrificedat8，12，16，24，48hourafterNMDAinjectedrespectively．Therats’retinawasHEstainedandobservedunderlightmicroscope．TheexpressionlevelofBrn3aweredeterminedbyimmunohist

6、ochemistryandReal—Timefluorescencequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(Real—TimeRT-PCR)．ResultsHEstainingshowedthatthestructureofretinaofnormalcontrolgroupwashistologicallywell-defined，uniforminstaining，andwithregularcellshape．Inexperimentalgroup，theretinalganglioncells(RGCs)werel

7、ooselyarrangedanditsnumberdecreasedwithtime．andtheretinabecamethinner．Real-TimeRT-PCRresultsshowedthatBrn3amRNAexpressiondecreasedinallexperimentaleyescomparedwithnormalcontroleyes(allP<0．05)．Therewas