实验性咬合创伤及牙周炎大鼠牙周组织中血管内皮生长因子的表达变化及意义

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1、学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。～虢尹俊翩签章弼二⋯山侈年河北医科大学．．研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人己经发表或撰写的研究成果

2、，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：尹俊导师签名：妇l>年≥．冠蝎日目录IIlllll1IIIIIIlUIIqlUllIIIY2337045中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“4研究论文实验性咬合创伤及牙周炎大鼠牙周组织中血管内皮生长因子的表达变化及意义前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一7日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一‘／材料与方法⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·12附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·20讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·21结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··24参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24综述实验性咬合创伤对牙髓组织影响的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38中文摘要实验性咬合创伤及牙周炎大鼠牙周组织中血管内皮生长因子的表达变化及意义摘要目的：本实验通过建立咬合创伤和牙周炎动物模型，采用免疫组化技术，观察在不同时间内血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的动态表达变化，推测咬合创伤在牙周组织损伤及修复过程中的作用机理，分析与咬合创伤相关的疾病的发生机制，为临床工作中咬合创伤疾病的早期发现及治疗提供更理想的思路。方法：选用120

5、只雄性Wistar大鼠(由河北医科大学动物实验中心提供)，清洁级，口腔卫生状况良好，咬合关系良好，无口腔疾病，体重2509．2809，鼠龄为3个月。将大鼠随机分为四组，分别为N组(正常对照组)、A组(咬合创伤组)、B组(牙周炎组)、C组(咬合创伤+牙周炎组)，每组30只，分别于建模后1天、3天、7天、2周、4周、6周从各组中随机选5只处死取材。采用浓度为1009／L的水合氯醛(3ml／Kg)腹腔注射麻醉，将大鼠仰卧固定于操作台上，用1％碘酊棉签、75％乙醇消毒双侧口腔黏膜。A组随机选取一侧上颌第一磨牙为实验牙，选用直径O．6mm的方丝，截取

6、长度约2mm。用金刚砂小球钻将咬合面打磨粗糙，隔湿后涂布酸蚀剂，酸蚀30．60秒，用水冲去，棉球隔湿，吹干后涂布粘接剂，光固化；复合树脂将方丝粘接至咬合面后光固化。B组随机选取一侧下颌第一磨牙为实验牙，选用直径0．2mm结扎丝结扎于第一磨牙牙颈部，并尽量位于龈沟内。C组按上述方法随机选择同侧上下颌第一磨牙为实验牙建模。N组不作任何处理。在各自规定的时间内，实验动物按0．3ml／1009剂量，给予10％水合氯醛麻醉后，用4％多聚甲醛经心灌注，待灌注结束后，立即截取磨牙区组织，保留根尖部骨板及牙龈组织，将树脂材料及结扎丝去除，。在4。C条件下于

7、4％多聚甲醛溶液中固定48h，再置于10％EDTA溶液4。C环境中脱钙4周。进行石蜡包埋并切片，切片厚5阻。对切片进行皿染色及VEGF免疫组织化学染色，封片后自然干燥。利用专业图像分析系统ImagePro．Plus6．0软件对VEGF免疫组织化中文摘要学染色结果阳性细胞数进行数据采集。应用SPSSl3．0统计学软件采用Kruskal．WallisH检验对数据进行总体分析，Wilcoxon秩和检验对4个实验组6个不同观察期的免疫反应结果进行组间两两比较，按a=O．05水准，P≤O．05为结果差异有统计学意义，反之，结果差异没有统计学意义。结果

8、：1H-E染色1．1对照组大鼠磨牙冠状切片显示，牙周膜排列整齐，根尖牙周膜与牙骨质连接紧密，牙槽骨与牙周膜界限明显，少数牙槽骨表面可见陷窝，并有多核细胞分布。在牙周组织血管周围也