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时间:2019-03-04
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1、朱雷:人参皂苷结构修饰物对人肝癌抗肿瘤活性研究1人参皂苷结构修饰物对人肝癌抗肿瘤活性研究研究生:朱雷导师:李吉萍副教授中文摘要目的:研究新化合物(HRG)且13人参皂苷结构修饰物对人肝癌抗肿瘤作用及作用机制。方法:(1)体外培养人肝癌SMMC.7721细胞,经不同浓度(25、50、10099.ml‘1)HRG作用:采用MTT实验检测HRG作用24、48、72h后细胞增殖抑制率、细胞计数实验检测生长曲线的变化、细胞集落实验检测集落形成率、流式细胞技术分析细胞周期的分布;(2)采用划痕实验、Transwell小室穿膜实验检测HRG对细胞迁移、侵袭能力的影响
2、,采用Westernblot实验检测HRG对肿瘤细胞迁移相关蛋白整合素(avl33)和基质金属蛋白酶.2(MMP.2)的表达情况;(3)HRG作用于HepG2.CAM移植瘤模型,观察药物对移植瘤体积、诱导血管数、瘤重和抑瘤率的影响。结果:(1)人肝癌SMMC.7721细胞经(25、50、10099.ml。1)HRG处理后:各组细胞形态与对照组相比均发生不同程度的改变;各浓度组HRG均能够抑制肿瘤细胞的增殖,并具有一定的剂量和时间依赖性;HRG能够抑制肿瘤细胞的集落形成率,与对照组比较有显著差异;HRG能够调控肿瘤细胞的细胞周期,对肿瘤细胞S时相有明显阻
3、滞作用,使进入分裂期的细胞减少,与对照组比较有显著差异。(2)5099.ml~、100Irtg.ml‘1HRG可明显降低肿瘤细胞的迁移能力;HRG能够明显抑制细胞侵袭作用,与对照组比较有显著差异;HRG能够抑制肿瘤细胞迁移相关蛋白整合素(avl33)和基质金属蛋白酶.2(MMP.2)的表达。(3)HRG能够显著抑制HepG2-CAM移植瘤的生长,与模型组比较,2599.ml。1组对移植瘤的生长抑制作用呈统计学差异P<0.05;5099.ml‘1组呈显著性差异P<0.01;10099.mlo组呈极显著性差异P<0.001。结论:(1)HRG对人肝癌SMM
4、C.7721细胞增殖有抑制作用,且具有一定的剂量和时间依赖性,同时能够调控细胞周期,从而抑制细胞的增殖。(2)HRG具有抑制人肝SMMC.7721细胞迁移和侵袭的作用;其作用机制可能与下调肿瘤细胞迁移相关蛋白整合素(avl33)矛n基质金属蛋白酶.2(MMP.2)的表达有关。(3)HRG具有抑制HepG2.CAM移植瘤生长的作用。关键词:人参皂苷结构修饰物(HRG);人肝癌SMMC一7721细胞;移植瘤扬州大学硕士学位论文2Studyonanti--tumoractivitiesofGinsenosidestructuremodificationont
5、hehumanlivercancerMastercandidate:LeiZhuSupervisor:Prof.JipingLiAbstractUllIllllIllllIIIlllIY2418664Objective:ToevaluatetheinfluenceofHRGonthehumanlivercancerandthemechanism.Methods:f1)HumanlivercancercellsSMMC-7721wereculturedinvitrowithdifferentconcentrationofHRG(25、50、100/ag.
6、ml。11.CellgrowthinhibitingratewasdetectedbyMTTassay,cellgrowthcurvewasdetectedbycellcountassay,cellcolony-formingrateandcellcolony·forminginhibitingrateweredetectedbycellcolonyassay,cellcycledistributionwereanalyzedbyflowcytometryassay.(2)CellMigrationandinvasionweredetectedbysc
7、ratchassay、transwellassay;theeffectsofHRGontheexpressionofMigration-relatedproteins(avl33andMMP一2)weredetectedbyWesternblotassay.(3)HepG2-CAMWastreated谢thHRG,observingtumorvolume,thenumberofbloodvessels,tumorweightandinhibitingtumorrate.Results:(1)HumanlivercancercellsSMMC-7721w
8、eretreatedwithdifferentconcentrationofHRG(25、50
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