楤木皂苷抗肿瘤活性研究论文

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时间:2018-11-18

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1、楤木皂苷抗肿瘤活性研究论文任美萍,刘明华,陈怡,肖顺汉,李华,章卓【摘要】目的研究楤木皂苷的体内外抗肿瘤作用。方法以人红白血病细胞株K562、人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株LOVO和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231为模型,采用cellcountingkit-8(CCK-8)检测楤木皂苷的体外抗肿瘤活性;以小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180为移植性肿瘤模型,检测楤木皂苷的体内抗肿瘤活性。结果楤木皂苷可抑制K562、HepG2.freelg·L-1,均大于30mg·L-1;在50,100mg·kg-1时,楤木皂苷对小鼠肝癌H22的抑瘤率分别为28.8%,4

2、7.06%,对小鼠肉瘤S180的抑瘤率分别为27.94%,54.92%。结论楤木皂苷体外抗肿瘤活性弱,但体内抗肿瘤活性较强。【关键词】楤木皂苷;抗肿瘤;CCK-8;H22;S180Abstract:ObjectiveTostudytheantitumoractivityofAraliasaponinsinvitroandinvivo.MethodsThecytotoxicityofAraliasaponinsonhumanleukemiaK562,hepatomacarcinomaHepG2,humancolorectalcarcinomaLOVOandmam

3、maryadenocarcinomaMDA-MB-231inedbycellcountingkit-8(CCK-8)assay.TheinhibitoryeffectofAraliasaponinsontumorgroodelsofhepatoma22(H22)andimplantedsara180(S180)inmice.ResultsAraliasaponinsinhibitedtheproliferationofK562,HepG2,LOVOandMDA-MB-231cells,theIC50valuesg·L-1,respectively,above3

4、0mg·L-1.Atdosesof50,100mg·kg-1,theinhibitoryratesofAraliasaponinsonH22andS180oractivityinvitro,.freeloractivityinvivo.Keyor;CCK-8;H22;S180五加科楤木属植物,其味苦、辛,性平,常以根皮入药,具有活血化淤、祛风行气、镇痛消炎、健胃利尿、清热解毒之功效[1~3]。已有研究表明楤木皂苷具有明显的抗肿瘤活性和提高免疫功能的作用[4]。本研究对楤木皂苷进行了体内外抗肿瘤作用的初步研究,旨在为楤木皂苷在临床肿瘤治疗中的应用提供实验依据。1

5、材料与仪器1.1药品与试剂楤木皂苷由泸州医学院药物研究所提供,临用前用生理盐水配制并稀释;顺铂(DDP)注射液:云南个旧生物药业有限公司,批号:070601。RPMI1640培养基:GIBCO公司产品;胎牛血清:天津灏洋生物制品科技责任有限公司;CCK-8(cellcountingkit-8):碧云天生物技术研究所。1.2细胞株和瘤株人红白血病细胞株K562、人肝癌细胞株HepG2、人结肠癌细胞株LOVO和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231均引自四川大学华西医学中心,采用含10%胎牛血清的RPMI1640pH7.4的完全培养基,在37℃,5%CO2条件下常规培

6、养。小鼠肝癌H22和小鼠肉瘤S180,引自四川大学华西医学中心。1.3动物昆明种小鼠,18~22g,雌性,由泸州医学院动物实验中心提供,合格证号:川实动证第17号。1.4仪器酶标仪:北京普朗新技术有限公司,型号:DNM-9602;倒置相差显微镜:日本Olympus公司,型号:CKX41;CO2培养箱:日本Sanyo公司,型号:MCO-15A;DNM-9602;电子天平:上海民桥精密科学仪器有限公司,型号:FA1104N;离心机:北京医用离心机厂,型号:LG10-3A。2方法2.1CCK-8检测楤木皂苷对人癌细胞增殖的抑制作用分别取对数生长期的K562、HepG

7、2、LOVO和MDA-MB-231细胞,0.25﹪胰酶制成单个细胞悬液,细胞浓度为1×108/L,接种于96孔板,每孔90μl,悬浮细胞K562接种后立即加药,其它贴壁细胞培养24h待其贴壁后加药。每孔加药10μl,每个浓度3个复孔,楤木皂苷终浓度分别为31.25,62.5,125,250,500mg·L-1,阴性组加等体积无血清RPMI1640,继续培养48h,每孔加入CCK-810μl继续培养1h,酶标仪450nm波长下检测各孔吸光度A值,按下列公式计算抑制率。细胞增殖抑制率%=[1-(A给药组-A空白孔)/(A阴性对照组-A空白孔)]×100﹪,LOGI

8、T法计算半数抑制浓度(IC50)。2.

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