德氏乳杆菌微胶囊性能评价及对肠道菌群调节作用研究

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1、分类号⋯⋯⋯⋯⋯UDC密级⋯⋯⋯⋯⋯⋯舅秀庐Z-擎硕士研究生学位论文德氏乳杆菌微胶囊性能评价及对肠道菌群调节作用研究申请人：学号：培养单位：学科专业：研究方向：指导教师：完成日期：王福颖2111212生命科学学院微生物学微生物产品开发与制备孙庆申2014年3月27日中文摘要益生菌及其制剂对人体肠道的益生功效很大一部分是通过肠道菌群的变化来实现的，因此通过检测肠道菌群的变化来反应益生菌及其制剂的益生功效是非常可行的方法。肠道菌群作为衡量益生茵的标准及其功能近年来也受到了广泛的关注。本课题研究的目的是在实验室前期研究的基础上进一步考察德氏乳杆菌微胶囊的性能以及对抗生素致小鼠肠道菌群失调模型的调节

2、作用，为其作为功能性保健食品的开发与应用提供前期工作基础。利用循环改变pH值法制备德氏乳杆菌微胶囊，冷冻干燥后得含菌量(10．87+0．13)lgcfu／g，冻干后菌体存活率为(68．55+13．39)％。扫描电镜(SEM)观察微胶囊的结构表明，德氏乳杆菌外部结构平滑，在内部包埋大量菌体，外形较饱满。微胶囊的稳定性实验表明，．20。C为微胶囊的最佳贮存温度，同时在此温度下贮存90d后，微胶囊中的活菌数仍然可以达到109CFU／g。通过模拟人体胃肠道实验可以看出，’裸菌耐胃酸、耐胆盐能力较差，菌体浓度下降约4．5个数量级；德氏乳杆菌微胶囊经过相同处理后，菌体浓度下降约2个数量级，仍保持较高的菌

3、体浓度，可见微胶囊对菌体有一定的保护作用。德氏乳杆菌微胶囊对小鼠肠道菌群调节作用研究。使用盐酸林可霉素建立小鼠肠道菌群失调模型后，分别给小鼠灌胃生理盐水、微胶囊、裸菌，监测小鼠的临床行为，同时检测小鼠血清中免疫球蛋白G(IgG)、白介素一2(IL一2)含量，小肠粘膜中分泌型免疫球蛋白A(S19A)含量及盲肠内容物中的主要菌群的变化情况，以及观察小肠病理组织学变化和脏器指数。研究结果显示：在灌服较大剂量的抗生素后，小鼠肠道内菌群的数量与对照组比较都出现明显的下降(P<0．01)，同时，IgG、IL．2和SlgA含量、以及肝脏和脾脏指数与对照组比较下降明显(P<0．01)；实验14d后，自然恢复

4、组、微胶囊治疗组和裸菌治疗组小鼠肠道内的乳酸杆菌、双岐杆菌、肠球菌、肠杆菌数量明显上升，其中微胶囊治疗组和裸菌治疗组小鼠肠道内的双歧杆菌和乳酸杆菌数量明显高于正常对照组(P<0．01)，并且微胶囊组双歧杆菌数量明显高于裸菌组(P<0．05)。两治疗组小鼠的血清IgG、IL一2含量，黑龙江大学硕士学位论文肠粘膜SlgA含量恢复至正常水平(P>0．05)，其中微胶囊组SlgA含量明显高于裸菌组(P<0．05)；其脾脏指数与正常对照组相比无显著性差异(P>0．05)，肝脏指数微胶囊组明显高于对照组，差异极显著(P<0．01)，并且微胶囊组肝脏指数明显高于裸菌组(P<0．05)；同时两治疗组小鼠的小

5、肠病理损害明显得到恢复，而自然恢复组则不明显。本研究结果表明，灌服德氏乳杆菌微胶囊对调节机体内肠道菌群数量有很大的作用，能够帮助恢复肠道微生态平衡，增强机体的部分免疫功能，同时可以显著地改善机体肠道组织的病理损害现象。德氏乳杆菌微胶囊对治疗抗生素所引起的肠道菌群失调有很好的效果，为其作为功能性保健食品市场的开发奠定了基础。关键词：德氏乳杆菌微胶囊；肠道菌群；免疫功能AbstractTheprobioiceffectofprobioticsandtheirpreparationsonhumanintestinesmayberealizedonalargepartbymonitoringthec

6、hangesofintestinalflora．Therefore，itisfeasibletoreflecttheprebioticeffectoftheseproductsbymeasuringtheintestinalflorachanges，whichhasbeenpaidmuchattentioninrecentyears．Basedonthepreviousstudyinourgroup，thepurposeofthisistoevaluatethepropertiesofLactobacillusdelbrueckiimicrocapsuleandtheirregulating

7、effectonintestinalflorafromantibiotics—causedintestinaldysfunctionalmice，thusprovidingabasisforthedevelopmentandapplicationoftheproductsasfunctionalfoodgradients．Lactobacillusdelbrueckiimicrocapsuleswerepre