资源描述:
《藏药余甘子药材和其鞣质部位指纹图谱评价探究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、藏药余甘子药材和其软质部位指纹图谱评价探究[摘要]建立不同产地藏药余甘子药材及其软质部位HPLC指纹图谱。采用DiamonsilC18(4.6mmX250mm,5um)色谱柱,甲醇-0.2%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1mL•minT,柱温30°C,检测波长260nmo提取13个色谱峰为药材指纹图谱共有峰,11个色谱峰为软质部位指纹图谱共有峰,采用对照品指认了5个主要色谱峰,运用相似度评价软件对所收集的8个不同产地藏药余甘子药材及其软质部位进行系统比较与归类,8个余甘子药材相似度在0.763〜0.993,软质部位相似度在0.903〜0.991,
2、通过聚类分析、主成分分析将不同产地的余甘子药材和软质部位分别聚为3类。该法重复性好,简便可靠,为不同产地藏药余甘子药材及其软质部位质量控制和评价提供依据。[关键词]藏药;余甘子;软质部位;HPLC指纹图谱;质量评价余甘子为大戟科植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的干燥成熟果实,2000年版《中国药典》开始将其列为藏药收载,余甘子主要用于血热血瘀、消化不良、肝炎、咳嗽、喉痛、口干等的治疗,现代药理证明它有降脂、降血糖、抗氧化、抗癌等多种作用,在许多民族药中都有应用。余甘子主要含软质及酚酸类成分,未成熟果实软质含量达30%〜35%,干燥果
3、实含软质14%左右,现代研究表明软质具有抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗癌、护肝益肾、抗病毒、抗菌等药理活性作用,这些与余甘子的药理作用一致。目前对余甘子的质量控制主要有HPLC测定没食子酸、软花酸、柯里拉京、诃黎勒酸、粘酸-2-0-没食子酸酯等成分的含量[1-5],分光光度法测定总软质含量[6-7]o余甘子主要产于尼泊尔、印度和我国南方地区,藏药中以个大肉厚的尼泊尔余甘子为上乘,很少用果小肉薄的云南等内地药材。中药指纹图谱能同时反映中药化学成分和它们之间的比率,可以比较全面地反映中药材质量。为了有效控制余甘子质量,本论文在报道测定比较8个不同产地余甘子中5
4、个主要单体成分诃黎勒酸(chebulagicacid)、粘酸-2-0-没食子酸酯(mucicacid2-0-gallate)、没食子酸(gallicacid)、柯里拉京(corilagin)、软花酸(ellagicacid)及总软质含量基础上,建立了8个不同产地余甘子药材及其鞍质部位的HPLC指纹图谱,通过与对照品对照、相似度评价、聚类分析、主成分分析等方法对所收集的8个不同产地余甘子药材及其鞍质部位进行分析归类,为藏药余甘子的合理用药和质量控制提供依据。1材料Waters1525型高效液相色谱仪;Waters2996型DAD检测器;Empower软
5、件;25uL可调进样器;1/10万电子分析天平(SartoriousBT25S型,北京赛多利斯仪器有限公司);KQ-500DE超声波清洗器(100W,昆山超声仪器有限公司)。甲醇(Fisher,色谱纯);蒸馆水(屈臣氏);其他试剂均为分析纯。余甘子药材购自北京藏医院(产地尼泊尔)、河北安国药材市场(产地云南)和安徽亳州药材市场(产地印度、福建、广西、四川、贵州、新疆),经北京中医药大学生药系阎玉凝教授鉴定为大戟科植物P.emblica的干燥果实。软质部位由本实验室建立的稳定制备工艺制备,水提取样品,上大孔树脂纯化,得到软质部位的软质含量为54.3%0
6、诃黎勒酸、没食子酸、粘酸-2-0-没食子酸酯、柯里拉京、软花酸对照品,均为自制,经UV,IR,MS,1H,13C-NMR鉴定结构,HPLC检测,峰面积归一化法测定纯度大于98.50%,符合定量要求。2方法与结果2.1液相色谱条件DiamonsilC18色谱柱(4.6mmX250mm,5pm);柱温30°C;流动相为甲醇-0.2%冰醋酸水;流速lmL・min-1;检测波长260nm;洗脱梯度见表1。2.2样品液的制备2.2.1药材样品液制备称取不同产地余甘子药材粉末(过50目筛)约200mg,精密称定,置100niL锥形瓶中,加入50%甲醇50niL,
7、称重,100MHz超声60min,补足失量,滤过,取续滤液2mL置10niL量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,备用,进样前经0.45Um微孔滤膜滤过。2.2.2软质部位样品液制备称取余甘子软质部位5mg,精密称定,置于10mL量瓶中,加入50%甲醇溶解稀释至刻度,摇匀,备用,进样前经0.45um微孔滤膜滤过。2.3余甘子药材及软质部位特征图谱方法学考察2.3.1精密度考察分别精密吸取同一余甘子药材及软质部位样品溶液,连续进样6次,采用《中药色谱特征图谱相似度评价系统》进行分析,以没食子酸为参照物,计算各共有峰的相对保留时间的RSD2.4余甘子药材
8、及其软质部位指纹图谱的建立与评价分别取8个不同产地的余甘子药材及其软质部位,按照2.2方法制备样品溶液,2.