褐飞虱类酵母共生菌不同抗性菌株的蛋白质组学研究

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1、指导教师签名：论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4．评阅人5：答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4．委员5：是盹UdV0nDroteomlCS0ldlllerentreSlStantstrains0tVeaSt—llKeSVmDloteSisolatenIromDrownDlantn0DDeL11-u‘NUaparvatalugensrvata【StaDIMallAuthor’Ssignature：一●Supervisor7Ssignature：ExternalReviewers：ExaminingCommitteeChairperson：ExaminingC

2、ommitteeMembers：Dateoforaldefence：杭州师范大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得盘刿竖整盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：匆洒兹签字日期：砷7垆年歹月眵日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解揎刿堙整基堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅

3、和借阅。本人授权揎．州监整盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：刻竭裁导师签名：／1删7)VI签字日期：如垆年后月9日签字日期：知肜年莎月矽日本研究承蒙国家自然科学基金“褐飞虱类酵母共生菌响应吡虫啉胁迫的蛋白质组学解析，，(编号：31272040)和浙江省自然科学基金“褐飞虱体内类酵母共生茵尿酸酶基因的RNAi研究’’(编号：LYl3C140008)资助本研究工作在浙江省农业科学院“浙江省植物有害生物防控重点实验室——省部共建国家重点实验室培

4、育基她，，完成兀月k杭州师范大学硕士学位论文刖舀前言褐飞虱Nilaparvatalugens(StAl)是我国及东南亚国家水稻生产上的一种重要迁飞性害虫，严重威胁我国水稻的安全生产。生产上，化学农药仍是防治褐飞虱的主要手段。由于杀虫剂的大量频繁使用，褐飞虱对杀虫剂产生抗药性，导致化学防治失败，造成褐飞虱大发生，如2005年全国褐飞虱大发生的主要原因之一就是褐飞虱对吡虫啉产生高度抗药性，其抗药性增加了70．475倍(程家安等，2006)。因此，研究阐明褐飞虱抗药性产生发展机制、探索褐飞虱抗药性的延缓和治理途径是我国水稻生产中急需解决的重要课题。近年来，有关褐飞虱对吡虫啉的掘}生

5、机理研究已有许多报道，研究发现褐飞虱对吡虫啉的抗性机制可能与酯酶(羧酸酯酶)、谷胱甘肽．S．转移酶和细胞色素P450单加氧酶等解毒酶的解毒作用增强、乙酰胆碱受体敏感性下降等有关(王彦华等，2005；Liueta1．，2005；Weieta1．，2009)，如wen等(2009)发现褐飞虱对吡虫啉的抗性水平与细胞色素P450单加氧酶和酯酶的活性提高成正相关。但到目前为止，褐飞虱对吡虫啉产生抗药性，特别是其快速产生高水平抗药性的分子机理仍不是很清楚。飞虱、蚜虫等同翅目昆虫体内普遍存在共生菌，这些共生菌与寄主昆虫互惠互利、协同进化，在昆虫的生长发育、繁殖及其适应性过程中起十分重要的

6、作用(陈列忠等，2006；Gibson，2010)。褐飞虱共生菌是一种类酵母菌(yeast．1ikesymbiotes，简称YLS)，隶属于子囊菌亚门核菌纲的假丝酵母属(Candida)，通常存在于腹部脂肪体内(Nodaeta1．，1977)，芽孢生殖为主，并以卵母细胞垂直传递的方式直接传给子代。褐飞虱体内的类酵母共生菌至少包含解脂假丝茵母、隐球假丝酵母和季也蒙毕赤假丝酵母等多个种类(张珏锋等，2007；Dongeta1．，2010)，这些共生菌在褐飞虱致害性变异(吕仲贤等，2001a，2001b；Luetal．，2004)、体内甾醇类物质代谢、氨基酸和维生素合成与供给(王国

7、超等，2005；Douglaseta1．，2009)、氮素循环和蛋白质合成(Sakakieta1．，1996)等过程中起重要作用。烟碱、印楝、甲基嘧啶磷、芸香苷等外源化合物能诱导烟草甲(Lasiodermaserricorne)体内类酵母共生菌(Symbiotaphrinakochii)的羧酸酯酶活性，而且共杭州师范大学硕士学位论文生菌对培养基中的结合态烟碱有一定分解作用(薛宝燕，2005；Dowdeta1．，1990；ShenetaI．，1989)。这一研究结果说明共生茵与害虫对杀虫剂的适应以及抗药性