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时间:2019-02-25
《自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:鲤鱼El期:翌!三二皇二兰兰苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文
2、的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在——年一月解密后适用本规定。非涉密论文口论文作者签名:导师签名:日自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨中文摘要自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨中
3、文摘要目的:观察自噬对氧化低密度脂蛋白(ox.LDL)在人脐静脉内皮细胞(HUvECs)中聚集的影响。方法:1.运用不同时间点的Dil.OX.LDL处理HUVECs,采用流式细胞技术检测HUVECs中Dil.OX.LDL的含量。2.在自噬诱导剂雷帕霉素和抑制剂3甲基腺嘌呤(3MA)干预下,观察自噬对Dil.OX.LDL在HUVECs中聚集的影响。3.在雷帕霉素和3MA干预下,通过免疫荧光技术观察HUVECs中Dil—OX.LDL与自噬标记物LC3以及溶酶体标记物LAMP1的共定位情况,以及HUVECs中LC3与LAMPl的共
4、定位情况,初步探讨自噬抑制HUVECs中OX.LDL聚集的可能机制;采用蛋白免疫印迹方法检测自噬流相关蛋白LC3、beclinl、LAMPl、P62的蛋白含量,进一步证实自噬参与了OX.LDL在HUVECs中的降解。结果:1.流式细胞术检测结果显示Dil.OX.LDL在HUVECs中的积聚量随时间点的延长而增加,3h细胞内Dil.OX.LDL是0小时的8.53倍,3h时间点下雷帕霉素可抑制HUVECs中OX.LDL的积聚(P=-0.003)而3MA能够增加HUVECs中OX.LDL的积聚(P=-0.035)。2.免疫荧光技术
5、显示3h时间点下,Dil.OX.LDL与LC3及LAMPl发生大量共定位,此时LC3与LAMPl也大量共定位,同时Dil—OX—LDL与LC3及LAMPl、LC3与LAMPl的共定位能够被雷帕霉素增加,被3MA所抑制。中文摘要自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨3.免疫印迹技术结果显示,OX.LDL作用于HUVECs3h后,LC3.II/LC3.I(仁O.024)、beclinl(卢0.005)及LAMPl(P<0.001)蛋白表达明显增加,P62蛋白水平降低(尸<0.001);与OX.LDL组相比雷
6、帕霉素能够进一步增加LC3.II/LC3.I(P=-0.045)和beclinl(P=-0.001)蛋白表达,降低P62(P=-0.030)蛋白表达;与OX.LDL组相比3MA能够降低LC3.II/LC3.I(P<0.001)和beclinl(P7、和溶酶体融合后,在自噬溶酶体中降解,自噬溶酶体通路参与HUVECs中OX.LDL的降解。关键词:白噬;溶酶体;氧化低密度脂蛋白;人脐静脉内皮细胞;降解作者:韩侨指导老师:刘春风教授李文副教授自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨AbstractThemechanismofautophagyinhibitsOX--LDLaccumulationinHUVECsAbstractobjective:OxidizedLow-densitylipoprotein(OX-LDL)hasagreatimplicati8、onintheinitiationofatherosclerosis.OurpreviousstudyreportedthatOX-LDLcanactivateautophagyinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs).Thereforest
7、和溶酶体融合后,在自噬溶酶体中降解,自噬溶酶体通路参与HUVECs中OX.LDL的降解。关键词:白噬;溶酶体;氧化低密度脂蛋白;人脐静脉内皮细胞;降解作者:韩侨指导老师:刘春风教授李文副教授自噬抑制氧化低密度脂蛋白在人血管内皮细胞聚集的作用及机制探讨AbstractThemechanismofautophagyinhibitsOX--LDLaccumulationinHUVECsAbstractobjective:OxidizedLow-densitylipoprotein(OX-LDL)hasagreatimplicati
8、onintheinitiationofatherosclerosis.OurpreviousstudyreportedthatOX-LDLcanactivateautophagyinhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs).Thereforest
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