lps对不同成熟度新生小鼠脑发育的影响及epo的脑保护作用

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1、硕士学位论文LPS对不同成熟度新生小鼠脑发育的影响及EPO的脑保护作用作者姓名：庄方莉导师姓名：徐发林副教授学科门类：医学专业名称：儿科学培养院系：第三临床学院完成时间：2012年5月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterTheimpactofLPSonbraindevelopmentofnewbornmiceatdifferentmaturitylevelandtheprotectiveeffectofEPOonbrainByFangliZhuangSupervisor:Prof

2、.FalinXuPaediatricsTheThirdClinicalCollegeofZhengzhouUniversityMay2012LPS对不同成熟度新生小鼠脑发育的影响及EPO的脑保护作用研究生：庄方莉导师：徐发林副教授专业：儿科学郑州大学第三临床学院河南郑州450052摘要背景和目的围生期感染可以导致早产及新生儿脑损伤，而且可以作为脑损伤独立的危险因素。近年来，人们已经利用细菌内毒素成分一脂多糖（LPS)，成功建立由感染导致的新生动物脑损伤模型，经典的动物模型之一系利用孕鼠制做宫内感染，用来模拟产前感染对新生儿脑发育的影响，但比较生后感染对不同

3、成熟度新生儿脑发冇的影响及动物模型却较少见。本研究通过向不同円龄的新生小鼠腹腔内注射一定剂量的LPS,制备能够模拟临床早产儿和近足月儿慢性感染的动物模型，探讨生后感染对不同成熟度脑组织的损伤作用以及促红细胞生成素（EPO)对感染所致脑损伤的脑保护作用，旨在为新生儿脑损伤的防治提供依据。材料与方法2闩龄昆明清洁级新生小鼠随机分为4组：0.3mg/kgLPS组、0.6mg/kgLPS组、0.9mg/kgLPS组、生理盐水组，腹腔内分别注射各组的处理药物。每组中部分新生小鼠于第1次给药后6h采用酶联免疫吸附法（ELISA)测定脑组织中白介素-6(IL-6)水平；

4、剩余小鼠连续腹腔给药5d，观察体重变化、活动情况以及病死率，在最后一次给药后24h，称取各组新生小鼠的肝脏，以确定能模拟临床新生儿感染的LPS剂量。2闩龄和7R龄的新生小鼠分别被随机分为2俎：感染组（0.6mg/kg的LPS)、对照组（等容积的生理盐水），分别连续腹腔给药5d,毎天1次，继续1^养^12闩龄时，免疫组化方法检测脑组织中碱性髓鞘蛋^(MBP)、祌经元特异ft.烯醇化酶(NSE)的表达情况，用來观察LPS对不同F1龄新lyj、！^脑门质和灰质的影响。2闩龄新生小鼠随机分为3组：对照组（等容枳的水）、LPS组(0.6mg/kg的LPS)、EPO干

5、预组(0.6mg/kgLPS+5000U/kgEPO)，分別连续腹腔给予相应的药物5天（给药的同吋腹腔注射50mg/kg的BrdU),！&Jf,1次用药24h后，免疫组化方法检测脑组织海马齿状回颗粒下层溴脱氧尿嘧啶(BrdU)和半胱氨酸天冬酶-3(Caspase-3)的表达情况，川來观察EPO对感染所致脑损伤后细胞增生和凋亡的影响。结果1.不同剂量的LPS对2闩龄新生小鼠脑组织IL-6水平、一般情况、休巧：及相对肝重的影响不同剂量的LPS组，脑组织中IL-6水平较仆：埋盐水组均有升!1?。0.9mg/kgLPS组新生小鼠给药后3天内全部陆续死亡，其余三组

6、新生小II未出现死亡。0.6mg/kgLPS组新生小鼠体重增长缓慢，而0.3mg/kgLPS组体重增长与牛：理盐水组无明显差异。相对肝重（肝重/体重）在不同剂量的LPS组均较生理盐水组增加明显(尸<0.05)。2.临床感染剂量的LPS对不同R龄新生小鼠大脑脑白质和灰质的影响2闩龄感染组小鼠脑组织中MBP和NSE的平均枳分光密度伹分別为：125.36±0.13、108.65±0.32，较同闩龄对照组（134.75±0.27、113.71±0.23)明显减少，差异有统计学意义(尸<0.05)；lflJ—7II龄感染组小鼠脑11质MBP的表达(134.74±0

7、.23)与同闩龄对照组（134.76±0.28)比较无明W差异，1(1了脑灰质NSE的表达(104.59±0.37)较同円龄对照fIL(113.61±0.23)明W减少，差异有统计学意义（/><0.05)。3.EPO对感染所致脑损伤的保护作MJ对照组、LPS织、EPOF预组海马齿状M颗粒下层BrdU

8、们性细胞数分別为：24.6±1.17、8.4±1.35、12.8±0.79，二组间比较^>^#充1十学怠义（尸<0.05)；II摘耍三组的Caspase-3阳性细胞数分别为：21.0±1.70、34.0±1.25、27.9±1.45，三组间比较差异有统计学意

9、义（P<0.05)。结论1.新生小鼠腹腔注射0.6mg/kg的L