大豆黄酮对衰老小鼠脑组织的保护作用-论文.pdf

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1、江苏农业科学2012年第40卷第6期-——289—-——才金玲，单群，陆军，等．大豆黄酮对衰老小鼠脑组织的保护作用[J]．江苏农业科学，2012，40(6)：289—291大豆黄酮对衰老小鼠脑组织的保护作用才金玲，单群，陆军，郑元林(1．海洋资源与化学重点实验室／天津科技大学环境科学与工程学院，天津300457；2．徐州师范大学生命科学学院，江苏徐州221116)摘要：研究大豆黄酮对D一半乳糖致衰老小鼠脑组织的保护作用。连续背部注射D一半乳糖6周，造衰老模型，然后灌胃大豆黄酮5周[试验组I、Ⅱ的剂量分别为5、

2、10mr,／(kg·d)]，监测小鼠不同脑区突触素含量、Na／K一ATP酶和ca“一ATP酶活性变化，探讨大豆黄酮对衰老小鼠脑功能保护作用的影响。结果表明，衰老小鼠灌胃大豆黄酮后大脑海马组织中突触素含量显著提高，同时大脑皮质和海马脑组织中Na／K一ATP酶和Ca2一ATP酶活性明显增强。与衰老对照组相比，大脑皮质和海马中的Na／K一ATP酶和Ca2一ATP酶活性增强程度与灌胃剂量具有正相关眭，说明大豆黄酮能够保护小鼠脑组织，具有显著的抗衰老作用。关键词：大豆黄酮；抗衰老；D一半乳糖；脑；ATP酶；突触素中图分

3、类号：Q956文献标志码：A文章编号：1002—1302(2012)06—0289—03黄酮类化合物能有效提高脑功能，延缓脑老化。其中，大1．1材料豆黄酮(daidzein)是一种异黄酮类植物雌激素类似物，具有较清洁级昆明系8周龄小白鼠8O只，体重(23．6±2．12)g，弱的类雌激素活性。大豆黄酮具有多种生物活性功能，能促购于徐州医学院试验动物中心，许可证号：SCXK(苏)2005—进动物生长、调节脑组织内神经递质含量、提高抗氧化能力、0005。大豆黄酮4，7一二羟基异黄酮，纯度≥98．O％，由南降低脑组织

4、氧化损伤程度等作用。刘文等研究表明，大京农业大学农业部动物生理生化重点实验室陈杰教授提供，豆黄酮能改善衰老小鼠的学习记忆能力。能量是维持细其化学结构如图1所示。蛋白质、Na／K一ATP酶和ca胞结构完整性和细胞基本功能的基础。每一个生物体均须利一ATP酶的检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所；突触用ATP提供能量，ATP的生成和水解主要由ATP酶所介导。素单抗是美国AFFinm公司产品；ABC免疫组化试剂盒购自ATP酶的活性是决定ATP能否合成和水解及其速度的关键华美生物工程公司。因素。ATP酶包括Na／K一

5、ATP酶、Mg2一ATP酶、Ca2一ATP酶、Ca“／Mg“一ATP酶等。其中，Na／K一ATP酶和Ca2一ATP酶具有十分重要的生物学作用。有研究表明，Na／K一ATP酶和ca“一ATP酶随着年龄的增长，在神经图1大豆黄酮(4．7一二羟基异黄酮)结构式组织中发生增龄性的减少。。衰老是机体细胞、组织、器官和系统结构功能增龄性衰退的过程，其中神经递质含量变化紫外一可见分光光度计(日本岛津，型号uV一2501是衰老的主要指标之一。突触素(synaptophysin，syn)突触素PC)，高速冷冻离心机(上海安亭科

6、学仪器厂，型号TGL一既是一种突触囊泡膜的钙结合蛋白，其本身的磷酸化也依赖16G)，冰冻切片机(德国莱卡制造，型号为LeicaCM1900)，显ca“。突触素是突触终末特异性标记物，研究突触素的表达微镜(德国莱卡制造，型号为DMRA2)，图像分析系统Leica可以反映突触的发生和密度。有研究表明，小鼠突触素免QwinQ55o。疫反应产物随年龄的增长而减少。。。本研究采用注射1．2方法D一半乳糖建立小鼠衰老模型，对小鼠灌胃大豆黄酮，观察其1．2．1试验动物分组及处理小鼠适应喂养1周后，随机不同脑区Na／K一AT

7、P酶、ca“一ATP酶活性、突触素含量分为4组：正常对照组、衰老对照组、试验组I、试验组Ⅱ，每的变化，探讨大豆黄酮对脑组织的保护机制。组各20只，雌雄各半。衰老对照组、试验组I、试验组Ⅱ小鼠采用颈背部皮下注射D一半乳糖[50mg／(kg·d)]建立衰老1材料与方法模型，正常对照组注射等量的生理盐水，连续6周。第7周开始，一方面继续每天给衰老对照组、试验组I和试验组Ⅱ小鼠注射D一半乳糖，同时，试验组I、试验组Ⅱ分别按5、收稿日期：2012—01—0710mr／(kg·d)剂量灌胃大豆黄酮(大豆黄酮用含1％吐温一

8、基金项目：天津市海洋资源与化学重点实验室(天津科技大学)开放80助溶)；衰老对照组和正常对照组灌胃不含大豆黄酮的等基金(编号：200913)；天津科技大学引进人才科研启动基金(编量的助溶剂，连续5周。号：20100410)。作者简介：才金玲(1976一)，女，黑龙江佳木斯人，博士，助理研究员，1．2．2指标检测ATP酶活性检测：将小鼠拉断颈椎处死主要从事衰老生物化学及能源微生物相关研究。Tel：(0