河北省肾综合征出血热疫区病原型别研究

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1、中文摘要河北省肾综合征出血热疫区病原型别研究摘要目的：采用流行病学、血清学和分子生物学相结合的方法，对河北省HFRS病原进行分氆，以期阐明疫区病原的型别特征及分布情况，为更为有效地诊疗和防控该病提供科学依据。方法：I总结河北省1981．2005年HFRS疫情资料，统计分析区域分布特征及发病季节特征。2疫源地调查，夹夜法捕鼠，无菌取鼠肺；3用冷冻切片机切鼠肺，冷丙酮固定后，问接免疫荧光法筛选汉坦病毒阳性鼠肺，总结分析疫源地特征；4从阳性鼠肺中提取总RNA，逆转录套式PCR(RT-nestedp(、R)扩增，进行基因分型；5在各重点疫区采集病人或疑似病人早期血液标本，提取总

2、RNA，逆转录套式PCR(RT-nestedPCR)扩增，进行基因分型；6选择代表性疫区监测点采集病人恢复期血清，采用血凝抑制试验(HI)进行血清分型7选择代表性疫区HFRS病毒株，采用属、型和亚属特异性McAb进行抗原反应谱分析。结果：l全省HFRS疫区广泛存在，11个地市均有发病，发病高密度县(市、区)主要集中在中部、南部和东北部地区，体中文摘要现出既高度散发又相对集中的特点。从疫情月分布构成情况看，主要集中于3-6月份，占全年总发病数的65．73％，有明显的春夏季发病高峰。22004～2005两年鼠间疫情资料显示，全省各地宅区鼠密度明显高于野外，宅区鼠种主要为褐家

3、鼠并lld,家鼠，分别占宅区总捕获鼠种的88．41％和10．85％：野外鼠种主要为褐家鼠、黑线姬鼠和大仓鼠，分别占野外总捕获鼠种的50．61％、13．72％和11．28％。河北省的优势鼠种为褐家鼠。从全省各地鼠带毒率分布情况看，我省肾综合征出血热疫源地带毒鼠主要以宅区褐家鼠为主，其次为宅区小家鼠，野外带毒鼠不是主要传染源。3对河北省汉坦病毒阳性鼠肺35份同时用SEO型和HTN型分型引物进行RT-nestedPCR扩增，产物经1％的琼脂糖凝胶电泳后显示32份阳性鼠肺所携带汉坦病毒均为SEO型，未发现HTN型。4从小家鼠、田鼠两个河北省的非优势鼠种中扩增出SEO型特异性条带

4、，证明它们携带SEO型汉坦病毒，再次证明不同鼠种可携带同型汉坦病毒，存在“宿主溢出”现象。548份患者早期血清标本用G1片段SEO型和HTN型分型引物分别进行扩增，12份经RT-nestedPCR内套引物扩增后证实为SEO型，未发现HTN型。提示河北省人感染汉坦病毒以SEO型为主。688份患者恢复期血清标本经HI法检测均呈阳性。依分型标准，II型血清76份，占总数的86．36％；I型1份，占1．14％，来源于秦皇岛：未定型11份，占总数的12．5％。在未定型中，以秦皇岛所占比例最高，邢台次之，石家庄最中文摘要低。7采用27株McAb对6株病毒株进行抗原反应谱分析显示，毒

5、株均与多数属特异性和II型特异性McAb反应。与I型McAb除S12同8F3反应阳性外，其它5株反应均为阴性，都属于II型病毒。各毒株问抗原性不尽相同，有的差异较大。结论：l河北省各地HFRS疫区是较为典型的II型HFRS疫区，但不排除I型病毒感染在局部地区的少量存在。2褐家鼠是河北省的优势鼠种，并且是河北省HFRS的主要传染源。3河北省代表性疫区宿主动物所携带的汉坦病毒血清型和基因型以II型为主，II型病毒是河北省HFRS病毒的优势型别，是造成病人感染和疫情广泛存在的主要型别。4河北省II型HFRS病毒抗原存在复杂性。5河北省野外宿主动物可携带II型病毒。不同鼠种可携

6、带同型汉坦病毒，存在“宿主溢出”现象。6应用套式RT-PCR对HFRS病毒进行基因分型，与血清学分型结果一致。套式RT-PCR对于HFRS病毒分型来讲，是一种可行的方法。关键词：肾综合征出血热；汉坦病毒；分型；RT-nestedPCR；McAb抗原性分析；血凝抑制试验．．茎墨塑墨一一一__-———__——_——_—--_-—_————-———●-—●--___-●-—————————_——●-————————————一一StudyontypeofHFRSPathogeninEpidemicAreasofHebeiProvinceABSTRACTObjective：Tot

7、ypetheHFRSpathogenbyepidemiology,serologyandmolecularbiologymethodsinHebeiprovince，andelucidatethetypecharacteristicofpathogenandthedistributioninepidemicareas，toprovidescientificevidencefordiagnoseandtreatandpreventandcontrolefficiently．Methods：1Theepidemicdataonhumanepi