红景天对aopps诱导小鼠足细胞转分化的影响

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1、中文摘要2．，J、鼠永生性足细胞培养传代转入37。C不含Y一干扰素的RPMll640培养液中，5％C02细胞培养孵箱继续分化后使用。3．观察AOPP刺激后的足细胞形态并检测细胞表达a—SMA蛋白最大效应剂量点及最佳效应时间点，得到最大效应剂量点AOPP浓度为200}tg／ml，最佳效应时间点为24小时。4．根据实验目的将全部细胞分成10组培养：MPC5空白对照组、MPCS+BSA组、MPCS+AOPP组、MPC5+AOPP+salidroside(0．1pmol／L)组、MPCS+AOPP+sali

2、droside(1岫aol／L)组、MPC5+AOPP+salidroside(10btmol／L)组、MPC5+AOPP+salidroside(100pmol／L)组、MPC5+AOPP+salidroside(200pmoUL)组、MPC5+thapsigargin(0．25pmoFL)组、MPC5+thapsigargin(O．即nol／L)+salidroside(200lamol／L)组。5．将各组细胞分别培养，于24h时收集细胞以W-estemblot方法检测Grp78、CHOP、a—

3、SMA、nephrin、podocin的蛋白表达水平。三、结果1．Westernblot测定各组G妒8及CHOP的蛋白表达水平观察1—3组，空白组及白蛋白组基本不表达Grp78及CHOP蛋白；在AOPPs(200pg／m]>作用后，足细胞Grp78、CHOP蛋白表达增高(P<0．01)；不同浓度红景天(0．11．tmol／L、11．tmol／L、109rnol／L、100pmol／L、2001umoFL)干预后，Grp78、CHOP蛋白表达降低(P<0．05)且呈剂量依赖性下降(P<0．05)。根据

4、相关文献报道Thapsigargin作为内质网应激诱导剂可特异性的作用于内质硕士学位论文网，而对其他细胞器无干扰，本实验观察到毒胡萝卜素同样可引起Grp78、CHOP蛋白表达增高(P<0．01)，红景天干预后毒胡萝卜素组的Grp78、CHOP蛋白表达降低(P<0．01)。2．Westernblot测定各组Q—SMA、nephrin、podocin的蛋白表达水平观察1-3组，与空白组及白蛋白组对比，AOPPs(2001ag／m1)作用后，足细胞Q—SMA蛋白表达水平增高而nephrin及podocin

5、蛋白表达水平降低(P<0．01)；不同浓度红景天(O．1lxmol／L、11．anol／L、10pmol／L、lOOlamoFL、200tamol／L)干预后，a—SMA蛋白表达水平降低及nephrin、podocin蛋白表达增高(P

6、AOPPs刺激下培养的足细胞Grp78、CHOP、a—SMA的蛋白水平升高，同时有nephrin及podocin蛋白表达水平的下调。红景天作为干预条件，作用后Grp78、CHOP、d—SMA蛋白表达水平下降而nephrin、podocin的表达升高，提示红景天可以逆转AOPP对小鼠足细胞的转分化作用，其可能通过ERS途径发挥作用。关键词：足细胞AOPPs上皮．间充质转分化红景天V硕士学位论文EffectofSalidrosideonMousePodocyteEpithelial-·mesenchym

7、alTransitionInducedbyAdvancedOxidationProteinProductsName：HuaJieSupervisor：ZhangJunABSTRACTBackgroundChronickidneydisease(CKD)isthevastmajorityofkidneydiseaseclinicalgeneraldesignation；mostofthekidneydiseasescanbelongtothescopeofchronickidneydiseaseina

8、dditiontotheacutenephritiswithacuteurinarytractinfection(renalacuteinflammatorydiseases)．Chronickidneydiseaseisaslowlydevelopingrelativelybenigndisease(orcommonclinicalpathologicalprocess)．Allkindsofdiseasesoftheurinarysystem(includedia