表达谱基因芯片筛选前体脂肪细胞分化相关基因的研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果表达谱基因芯片筛选前体脂肪细胞分化相关基因的研究【摘要】目的:运用基因芯片技术研究前体脂肪细胞分化相关基因表达谱的变化。方法:体外培养前体脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞。提取脂肪细胞总RNA,纯化mRNA后逆转录制备目标序列,应用含有4503种小鼠基因cDNA的表达谱芯片Mouse430_2进行差异表达谱分析。结果:在前体脂肪细胞分化的基因表达谱中差异表达基因共有640条,其中表达水平显著变化的有38条

2、,上调基因2条,下调基因1条。差异表达基因中有细胞凋亡相关基因、原癌基因和抑癌基因、细胞信号和传递蛋白基因等多种基因。这些基因可能与脂肪细胞分化相关疾病的发病机制有关。结论:采用基因芯片技术筛选脂肪细胞分化相关基因,可能为脂肪细胞分化相关疾病病因和发病机制的研究提供新思路。中国编辑。【关键词】前体脂肪细胞;基因表达;基因芯片[Abstract]Objective:ToscreenthedifferentlyexpressedgenesduringcelldifferentiatedofadipocyteT3-L1usingcDNAmic

3、roarray.Methods:T3-L1cellswerecultured,inducethemdifferentiated,isolatetotalRNA.ReverselytranscriptedtocDNAswithfluorescentdUTPtopreparethetargetsequences,thenthetargetsequenceswerehybridizedtocDNAmicroarray课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应

4、着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果of503humangenes.Afterwashing,thecDNAmicroarraywerescannedforthefluorescentsignalsandshoweddifferencesbetweenkindsofcells.Results:Among503geneprobes,theexpressionlevelof40geneschanged,genesshoweddramaticallydiffer

5、entialexpressedprofilewithupregulatedand1downregulatedgenes.Thedifferentialexpressedgeneswererelatedwithapoptosis,protoorantioncogene,cellsignalconduct,andytoskeleton,etc.Thesegenesmightberelatedwiththepathogenesisofadipocytedifferentiation.Conclusion:Theinvestigationsba

6、sedoncDNAmicroarraycansequencerelatedgenesinadipocytedifferentiation,andmayprovideanewideainstudyingpathogenesisofadipocytedifferentiation.[Keywords]T3-L1cell;Geneexpression;cDNAmicroarray脂肪组织不仅是被动的能量储存器官,而且是能够分泌多种激素类物质的内分泌器官;人类多种疾病与脂肪细胞分化及其调控失常有关,包括肥胖症、脂肪肝、高脂血症、糖尿病及乳腺癌等

7、疾病[1]。研究脂肪细胞分化机制及其调控,不仅对研究上述生理和疾病过程机制有重要理论意义,而且对其预防与治疗也具有实际意义。为此,课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果我们应用基因芯片技术研究3T3-L1细胞分化前后基因表达谱的改变,全面了解3T3-L1细胞分化所伴发的基因差异表达,研究3T3-L1细胞分化的产生机制并为寻找相应的干

8、预手段提供理论基础。1材料与方法材料T3-L1细胞由本实验室保存,DMEM培养基、胎牛血清(fetalbovineserum,FBS)、胰蛋白酶和TRIzol由美国Invitrogen公司提供,胰岛素、地塞

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