三种临床梅毒血清学检测方法的应用评价

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1、三种临床梅毒血清学检测方法的应用评价(江苏省徐州市第一人民医院检验科江苏徐州221002)【摘要】目的:初步评价梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(TP-EUSA)、螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、血浆反应素环状卡片试验(RPR)三种梅毒血清学检测方法,了解各项试验方法之间的相互关系和应用价值。方法:采用TPPA、TP-EUSA和RPR试验检测432例梅毒患者及60例健康体检者血清,34例RPR阳性患者进行治疗前后的试验检测跟踪,并对结果统计分析。结果:432例梅毒患者中,TPPA阳性431例,假阴性1例;TP-ELISA试验阳性430例,假阴性2例;RPR试验阳性201例。34例RPR

2、阳性梅毒患者治疗一个疗程后,RPR滴度下降或转阴28例,无变化3例,上升3例。TPPA和TP-EUSA方法灵敏度均较高,RPR灵敏度较低,三者联合检测灵敏度达100%,三种方法的特异性均高于98%。结论:TPPA和TP-ELISAA有较高的灵敏度和特异性,TP-ELISA适合初筛试验,TPPA适合确证试验,RPR进行半定量试验,可用于梅毒患者疗效观察及复发监测。【关键词】梅毒螺旋体;血清学试验;应用评价【中图分类号】R19【文献标识码】A【文章编号】1004-6194(2015)02-0114-02近年来,我国的梅毒患者呈逐年增长,这一现象已引起人们的高度重视。梅毒是由梅毒螺旋体

3、(TP)所引起的一种性传播疾病,临床诊断和治疗梅毒常需要血清学检验的结果来支持[1]。正确认识与评估梅毒血清学检测方法,对于指导临床诊断只有非常重要的意义[2,3]。木报告通过分析梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(EUSA)、螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、血浆反应素环状卡片试验(RPR)三种方法在梅毒诊断和治疗中的应用,分析其各自应用特点,现报告如下:1资料与方法1.1标木来源选择2013年2月-2014年10月在徐州第一人民医院皮肤性病中心就诊的432例患者,其中男298例,女134例,年龄15-81岁。同期选择体检健康者60例作为对照人群。1.2试剂与仪器RPR试剂由上海科华生物

4、技术有限公司提供;TPPA试剂由日本富士株式会社提供;EUSA试剂由北京万泰生物技术公司提供,所有试剂均在有效期内使用。仪器为BIO-RAD680酶标仪和YT-washII型全自动洗板机。13方法所冇试验操作均严格按照厂商说明书进行,每次试验均设阴、阳及质控对照。RPR半定量时,对检测样本进行倍比稀释,按定性试验方法进行检测,以最大稀释倍数凝集作为最终滴度。实验方法学评价包括灵敏度、特异性、漏诊率、误诊率和正确指数。1.4统计学方法釆用χ2检验进行统计学处理,P<0.05表示有统计学意义。2结果2.1在432例临床确诊为梅毒患者(梅毒诊断参照1995卫生部防疫司颁布

5、的梅毒诊断标准)中,TPPA阳性431例,假阴性1例;TP-ELISA试验阳性430例,假阴性2例;RPR试验阳性201例。ELISA与TPPA法阳性结果比较差异无统计学意义(P>0.05);RPR分别与ELISA、TPPA法比较差异均有统计学意义(P<0.01),见表1。对其中34例RPR阳性梅毒患者进行治疗前后跟踪检测分析,一个疗程后,RPR滴度下降28例,无变化3例,上升3例,而TP-ELISA、TPPA检测结果在治疗前后均为阳性,见表2。3讨论机体感染梅毒螺旋体后可产生特异性抗体(TP-Ab)和非特异性抗体,TP-Ab出现早、消失迟,即便经过抗病毒治疗仍可检出

6、,有的甚至可终生携带,故TP-Ab是诊断梅毒螺旋体感染的依据[4】。TPPA试验是将梅毒精制菌体成分包被在人工载体明胶颗粒上,这种致敏粒子和样品中TP-Ab进行反应发生凝集,可以检测出标本中的TP-Ab,并且可用来测定抗体效价[5]。本实验显示该方法诊断梅毒感染的符合率为99.22%,其特异性好,灵敏度高,误诊率仅为0.80%,1例假阴性标本为硬下疳患者的首次检测,可能与产生IgG、IgM量较低相关。但在用于半定量检测吋,反应吋间较长,不利于快速检测,另因TP-Ab在体内存在时间较长,所以建议临床不用TPPA作为梅毒筛查和疗效观察。TP-ELISA采用双抗原夹心法检测IgG和Ig

7、M抗体,本实验显示该方法与TPPA呈高度相关,敏感性与特异性均较高。2例假阴性标本是由于方法学原因,血清内抗体含量过高,出现“钩状效应”,1例假阳性是由于该标本严重溶血的技术原因造成,经TPPA确证为阴性。该方法操作简单,可自动化及原始数据易于保存等优点,适用于大批量血清标本的飾查。梅毒非特异性类脂抗体为梅毒侵犯及损伤组织所产生,RPR试验是应用相应抗原检测其存在,该试验操作简单快速[6]。本实验显示,RPR试验的灵敏度为46.5%,漏诊率为53.5%,但加入TELISA和TPP

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