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1、高效液相色谱法测定复方蛇床酊中蛇床子素的含量论文.freelm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(70∶30),流速为1.0mL/min;测定波长为322nm;柱温为室温。结果蛇床子素在0.018~0.126μg范围与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为98.55%,RSD=1.45%。结论该方法操作简便快速、准确可靠,可用于复方蛇床酊中蛇床子素含量的测定。【关键词】复方蛇床酊;蛇床子素;高效液相色谱法;含量测定Abstract:ObjectiveToestablishthed
2、eterminationmethodforostholinpoundShechuangTincture.MethodsHypersilODScolumnethanol-obilephase.ThefloL/minandthedetection.ResultsOstholhadagoodlinearrelationshipbetethodissimple,rapidandaccurate.ItcanbeappliedtodeterminingostholinpoundShechuangTincture.K
3、eyination复方蛇床酊为湖南中医药大学药学院研制的外用酊剂,由蛇床子、土荆皮、黄柏等中药组成,具有清热解毒、燥湿止痒、杀虫的功能,主治湿热带下及各种妇科炎症、皮肤瘙痒及湿疹等。蛇床子素为方中君药蛇床子的主要有效成分,.freelm×4.6mm,5μm,大连依利特分析仪器有限公司);流动相:甲醇-水(70∶30);流速:1.0mL/min;测定波长:322nm;柱温:室温;进样量为5μL。2.2对照品溶液的制备精密称取蛇床子素对照品适量,加乙醇制成9.0μg/mL的溶液,即得。2.3供试品溶液的制备
4、精密吸取复方蛇床酊0.2mL,置10mL量瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。2.4阴性对照溶液的制备以去掉蛇床子的复方蛇床酊处方,按复方蛇床酊的生产工艺制备阴性药液,再按“2.3”项下方法制备阴性对照溶液。2.5干扰试验照上述色谱条件,取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各5μL,分别注入色谱仪。供试品色谱图中,在与对照品色谱图相应的位置上,有一相同的色谱峰,而阴性对照溶液色谱图在此处无干扰(见图1)。2.6线性关系考察分别精密吸取对照品溶液2、4、6、
5、8、12、14μL进样,以峰面积对进样量(μg)进行线性回归,得回归方程:Y=4.392×106X-6036.38,r=0.9999。表明蛇床子素在0.018~0.126μg与峰面积呈良好的线性关系。2.7精密度试验用同一供试品溶液重复进样测定5次,以峰面积计算,RSD=1.06%。2.8重复性试验取同一批次的复方蛇床酊,按“2.3”项下方法分别制备5份供试品溶液,按上述色谱条件进行测定,结果平均含量为0.0203mg/mL,RSD=0.94%。2.9稳定性试验取同一供试品溶液,分别在制备后0、2、4、
6、6、12、16、24h进样,测定峰面积,计算,RSD=1.21%(n=7)。表明供试品溶液在24h内稳定。2.10加样回收率试验精密吸取已知蛇床子素含量(21.74μg/mL)的复方蛇床酊0.2mL共6份,按“2.3”项下方法制备,分别置6个10mL的量瓶中,精密加入对照品溶液适量,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,按上述色谱条件进行测定,计算回收率,结果见表1。表1加样回收率试验结果(略)2.11样品测定精密吸取各供试品溶液(4批各3份)5μL,按上述色谱条件进行测定,结果见表2。表2复方蛇床酊中蛇床子素的
7、含量测定结果(略)3讨论用紫外分光光度计对文中试验条件下蛇床子素对照品溶液作了波长扫描,发现其最大吸收波长在321.5nm,在