血管紧张素ⅱ对脐血cd34+细胞体外分化为巨核细胞的影响

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1、血管紧张素Ⅱ对脐血CD34+细胞体外分化为巨核细胞的影响作者：戴兵，何吉，陈舒，刘晋辉，秦斐，朱发明，严力行【摘要】　　为了探讨血管紧张素Ⅱ对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的影响，采用免疫磁珠法(MACS)分选8例健康产妇足月顺产胎儿脐血中的CD34+细胞，在含血小板生成素（TPO50ng/ml）、白介素-3（IL-310ng/ml）、干细胞刺激因子（SCF50ng/ml）的无血清培养液中添加浓度分别为50、100、1000μg/ml的血管紧张素Ⅱ作为实验组；同时以未添加血管紧张素Ⅱ的基础培养液作为对照组，培养14天后观察结果。细胞计数仪计数单个核细胞数（MNC）；流

2、式细胞仪计数培养体系中的CD41+细胞数、血小板数，及分析细胞周期；利用CD41单克隆抗体免疫荧光染色观察培养体系中的细胞情况。结果表明：与对照组比较，实验组单个核细胞数无明显改变（P>0.05）；而CD41+细胞和血小板数量有明显的增加(P<0.05)；细胞周期分析显示，实验组的4倍体细胞增加，并存在明显的凋亡(P<0.05)；荧光显微镜下观察对照组和实验组均可见大小不一的CD41+细胞。结论：血管紧张素Ⅱ可以促进脐血中CD34+细胞诱导分化为巨核细胞，并能促进巨核细胞产生血小板。【关键词】血管紧张素Ⅱ；CD34+细胞；巨核细胞；脐血　　Effectof

3、AngiotensinⅡonDifferentiationofUmbilicalCordBloodCD34+CellsintoMegakaryocytes　　AbstractThisstudyedtoinvestigatetheeffectofangiotensinⅡondifferentiationofcordbloodCD34+cellsintomegakaryocytesinvitro.TheCD34+cellsfromEightfreshumbilicalcordbloodsamplessortedbyahigh-gradientmagiccellsortingsy

4、stem(MACS)-freeculturemediumcontainingthrombopoietin(TPO)50ng/ml，IL-310ng/ml，stemcellfactor(SCF)50ng/mlanddifferentconcentrationsofangiotensinⅡ(0，50，100，1000μg/ml)for14days.Mononuclearcells(MNC)aticcellanalyzer.CulturedCD41+cellandplateletcountsinculturedsystem，andcellcycleetry.CD41specifi

5、cmonoclonalantibodystainingmunofluorescencemicroscopy.TheresultsshoberofMNCnotincreasedsignificantly（P>0.05），butthenumberofCD41+cellsandplateletsincreasedsignificantlyintreatmentgroup(P<0.05).Cellcycleanalysisrevealedthattheamountsof4Ncellsincreasedandapoptosiscellsobviouslyexistedin

6、treatmentgroup(P<0.05).Afterfluorescencestaining，moreCD41+cellsofdifferentsizeseansoffluorescencemicroscopyinbothgroups.ItisconcludedthatangiotensinⅡcaninducethecordbloodCD34+cellstodifferentiatetoegakaryocyte，andenhancethefunctionofmegakaryocytetoproduceplatelet.　　Keyegakaryocyte；umbil

7、icalcordblood　　血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）是肾素血管紧张素系统的一种主要活性物质，其生物学作用主要是调节机体内水、电解质和血压的平衡，但许多临床和体外实验结果提示，AngⅡ可能参与调控造血细胞的生长。国内外部分学者研究了AngⅡ对红系造血的影响［1-4］，但AngⅡ对巨核系的作用尚不清楚。在本实验中我们采用无血清培养体系体外诱导CD34+细胞扩增，探讨AngⅡ对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞和血小板生成的影响。　　接受材料和方法　　主要试剂　　AngⅡ（AnaSpec，I