益气化瘀方对腰神经根损伤大鼠神经细胞黏附分子的作用

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1、益气化瘀方对腰神经根损伤大鼠神经细胞黏附分子的作用作者：周重建，马迎辉，舒冰，王拥军，施杞【关键词】,神经肌肉接头［摘要］目的：探讨益气化瘀方对大鼠神经再生修复过程中神经肌肉接头部神经细胞黏附分子（neuralcelladhesionmolecule,NCAM）的作用。方法：大鼠L5神经根损伤后，予以益气化瘀方分别治疗10、20和30d。采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术，观察大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部NCAM的分布变化。采用α金环蛇毒萤光结合剂显示乙酰胆碱受体（acetylcholinereceptor,AChR），NIH图像分析系

2、统定量测定NCAM与AChR的重叠面积。结果：益气化瘀方组NCAM在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸以及与AChR的重叠面积均明显优于模型组。结论：NCAM的表达与AChR的神经支配情况密切相关。益气化瘀方可促进神经的再生修复。　　［关键词］神经肌肉接头;神经再生;益气化瘀方;神经细胞黏附分子　　EffectsofYiqiHuayuRecipeonneuralcelladhesionmoleculeinratsbarnerverootpression　　ABSTRACTObjective:TostudytheeffectsofYiqiHuay

3、uRecipeonneuralcelladhesionmolecule(NCAM)inneuromuscularjunctionsduringnerveregenerationinratsbarnerverootpression.Methods:Theratsbarnerverootpressionuscularjunctionsofsoleusmuscleinratsinedmunohistochemicalmethodandconfocallaserscanningmicroscopytechnique.Theacetylcholiner

4、eceptor(AChR)easuredagetechnique.Results:Theaggregates,sproutsandextensionsofNCAMintheneuromuscularjunctionsandtheoverlapareasofNCAMandAChRsitesintheYiqiHuayuRecipetreatedgroupprovedthanthoseintheuntreatedgroup.Conclusion:TheexpressionofNCAMisregulatedaccordingtothestateofi

5、nnervationformuscles.YiqiHuayuRecipemayacceleratethisnerveregenerationprocess.　　KEY）属于诱导性蛋白，这种细胞表面糖蛋白［1］广泛存在于发育中的神经系统，通过其自身所携带的大糖分子结构多唾液酸（polysialicacid,PSA）减弱NCAM与相邻其他细胞黏附分子之间的黏附性以介导细胞之间的黏附，参与控制神经元生长、发育的一系列过程，包括细胞迁移、突起生长、对靶的识别及调节细胞间的相互作用［2］。实验证明，骨骼肌失神经支配后，其神经肌肉接头部细胞外基质中NCA

6、M分子的表达将随之发生改变，这种变化对于稳定神经肌肉间的接触及促进运动终板的重新构筑具有重要作用［3］。由黄芪、麝香、川芎等组成的益气化瘀方具有益气化瘀、行气通络的作用，在治疗因椎间盘突出等原因所致的神经根损伤方面疗效显著［4］。前期实验证实，益气化瘀方对神经纤维［5］和施万细胞［6］有明显的促进作用，在此基础上我们进一步观察大鼠L5神经根受压后比目鱼肌神经肌肉接头部NCAM的形态变化，探讨该方促进神经再生的作用机制。　　1材料与方法　　1.1实验动物与分组选择胚胎期2周（E14）和出生后2周（P14）的SD大鼠，以及3月龄清洁级SD雄性成年

7、大鼠各8只作为正常对照组；另选3月龄清洁级SD雄性成年大鼠48只（上海中医药大学动物实验中心提供），体质量300～320g，随机分为L5受压后10d、20d、30d模型组和益气化瘀方治疗10d、20d、30d组，每组8只。　　1.2造模方法与取材采用本所1999年建立的腰神经根压迫造模方法［7］。造模后经预定观察时间，予以大鼠乙醚麻醉，打开胸腔，用0.01mol/L磷酸盐缓冲盐水（phosphatebufferedsaline,PBS）100～300ml（pH7.6）行心内灌注，采用0.1mol/L磷酸盐缓冲液（phosphatebuffer

8、,PB）（pH7.4）稀释的4%多聚甲醛进行前固定，取手术侧和自体对照侧（未行手术）比目鱼肌进行对比观察，发现所有手术侧的肌肉体积均小于对照侧。用大头针将标本固定（