胃癌组织cdx2和e钙粘蛋白表达与临床病理的关系

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1、胃癌组织CDX2和E钙粘蛋白表达与临床病理的关系作者：焦嫦亮，翁阳，李群，郑少江，吴文川，蔡仁桑，谭蓉【摘要】目的：探讨胃癌组织尾侧型同源转录因子2(CDX2)和E钙粘蛋白(Ecad)的表达与浸润、转移及预后的关系.方法：胃癌患者86例，以正常胃黏膜15例为对照，应用SABC免疫组化方法检测CDX2和Ecad的表达.结果：正常胃黏膜上皮中Ecad完全表达，而CDX2不表达.胃癌Ⅰ～Ⅱ期CDX2与Ecad的异常表达率分别为51.2%和54.9%，Ⅲ～Ⅳ期的CDX2异常表达率下降，而Ecad的则提高，分别为25.1%和78.8%，各分期间的差异有统计

2、学意义(P<0.05).伴有淋巴结转移的55例患者中，CDX2异常表达率为67.1%,而Ecad异常表达率为86.8%，均分别与相应的无淋巴结转移组存在统计学差异（P<0.01）.此外，CDX2和Ecad的表达还与细胞分化程度、肿瘤生长方式、癌细胞浸润深度及患者5a生存率有关(P<0.05).结论：CDX2和Ecad与胃癌的发生、浸润、转移有关，可联合判断预后.【关键词】CDX2基因；E钙粘蛋白；临床病理学；胃肿瘤；预后0引言近年来，大量研究已证实胃癌的发生、发展和预后是多基因改变的结果.研究胃癌相关基因及其蛋白分子不仅对于理解胃癌的发

3、病机制十分重要，而且对于发现在诊断和评价预后中有临床意义的分子标记物也同样重要.尾侧型同源转录因子2(caudaltypehomeoboxtranscriptionfactor2,CDX2)是人体中肠道特异性表达的核转录因子，在肠黏膜上皮细胞的发育及保持其形态、结构特征中起着重要作用.CDX2在结直肠肿瘤发生过程中扮演抑癌基因的角色，并与肿瘤的生物学特性及患者预后密切相关［1］，而关于CDX2对胃癌的研究不多.E钙粘蛋白(Ecadherin,Ecad)是钙黏附蛋白分子家族中的一种跨膜蛋白亚型，集中表达粘着连接.主要功能是介导上皮细胞与上皮细胞的黏附、维

4、持组织正常形态结构.关于Ecad的表达与胃癌浸润、转移的关系，国内外新近有不少相关报道［2］，但结果不一.基于以上原因，我们采用免疫组化方法检测86例胃癌组织中CDX2和Ecad的表达情况，探讨二者与胃癌发生、浸润、转移及预后的关系.1对象和方法1.1对象2000/2002胃癌手术标本86(男55，女31)例；年龄52.8±11.2(32～72)岁.全部获病理学诊断.患者术前均未行化放疗.随访时间5～60mo.分别根据国际胃癌新PTNM分期标准、Lauren分类法、胃癌组织学分类标准及淋巴转移情况对病例进行分组.正常对照组标本15例，为距胃癌边缘10cm以上

5、的胃黏膜组织，经病理学检查证实为无癌肿浸润.1.2方法采用免疫组织化学染色SABC法，标本经40g/L中性多聚甲醛固定,石蜡包埋，4μm连续切片，70℃烤片15min，梯度乙醇脱水，30mL/LH2O2灭活内源酶，PBS漂洗5min×3次.正常羊血清室温孵育15min.滴加20～30μLPBS稀释的一抗(1∶5的HECD1mAb)4℃过夜.PBS漂洗5min×3次.二抗、三抗依次37℃孵育45min，PBS漂洗5min×3次.DAB显色5～10min，自来水充分洗涤，苏木素复染5min，稀盐酸淡化30s，冲洗5min.脱水、透明、封片，镜检.设阳性对照,用PB

6、S替代第一抗体作阴性对照.鼠抗人CDX2mAb（工作浓度1∶50）、鼠抗人ECadmAb（工作浓度1∶50）和免疫组化采用链霉菌抗生素蛋白过氧化物酶法染色(SABC法),试剂盒均为SantaCruz公司生产，购自北京中山生物技术有限公司.CDX2蛋白表达阳性为胞核出现棕黄色颗粒.Ecad免疫染色阳性物质呈棕褐色，正常染色主要定位于细胞膜，即连续的细胞膜染色.超过40%细胞CDX2阳性表达记为阳性，否则记为阴性；而Ecad在胃癌组织中则为异常表达，超过30%细胞Ecad异常表达记为阳性，否则记为阴性［3-4］.统计学处理：所有数据用SPSS13.0处理,

7、计数资料采用χ2检验.生存分析用KaplanMEier法.P<0.05为差异具有统计学意义.2结果2.1CDX2和Ecad蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系通过统计学分析表明，CDX2和Ecad在胃癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及有无血管侵害均无关(P>0.05).而与胃癌的组织Lauren分型、有无淋巴转移、TNM分期、癌组织分化程度及肿瘤浸润深度均有关(P<0.05).CDX2在高分化程度癌组织中的阳性表达率为62.5%，低分化程度阳性率36.7%，Ecad的异常表达率随分化程度的恶化而升高，差异均有统计学意义(P<0

8、.05).在浸润深度方面