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时间:2018-07-08
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1、胃癌eIF4E和cyclinD1表达及其临床病理意义【关键词】胃癌真核细胞起始因子4EcyclinD1 0引言 真核细胞起始因子4E(eukaryoticinitiationfactor4E,eIF4E)是mRNA帽结合磷蛋白,是蛋白合成的限速因子。有研究表明,eIF4E表达水平在一些人类肿瘤组织和肿瘤细胞株中显著升高[1]。细胞周期素D1(cyclinD1)可通过与细胞周期素依赖激酶4(CDK4)结合形成复合物加快细胞由G1期进入S期,正调节细胞增殖周期,并在包括胃癌在内的多种肿瘤中表达增高[2]。本研究采用免疫组织化学方法检测eIF4
2、E和cyclinD1在胃癌组织中的表达,旨在探讨二者与胃癌临床生物学行为的相关性。 1资料与方法 1.1临床资料 收集2002年10月~2004年10月我院及湖北省肿瘤医院手术切除并经病理学证实的胃癌组织标本91例,男61例,女30例,年龄32~76岁,平均年龄51.2岁。按胃癌协作组制定的有关胃癌大体分型、组织学分型和临床病理分期等规范进行严格的病理诊断来判断肿瘤转移情况;91例胃癌石蜡包埋标本中,高分化腺癌31例,中分化18例,低分化39例,未分化3例;侵犯浆膜者58例,未侵犯浆膜者33例;有淋巴结转移53例,无淋巴结转移38例;T
3、NM分期:Ⅰ期14例,Ⅱ期22例,Ⅲ期45例,Ⅳ期10例。所有患者术前均未接受化疗和放疗。另选择同期胃镜及活检组织学正常的胃粘膜标本30例作为研究对照。所有标本经合理取材后用10%中性福尔马林溶液固定,经梯度酒精脱水后浸入二甲苯中,常规石蜡包埋,制成厚5μm的组织切片。 1.2试剂和方法 鼠抗人eIF4E单克隆抗体、鼠抗人cyclinD1单克隆抗体均为SantaCruz公司产品。免疫组化二步法试剂盒为AntibodyDiagnostic公司产品。DAB显色试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。免疫组化染色程序严格按试剂盒说明书操作。eIF4
4、E抗体及cyclinD1抗体的工作浓度均为1∶200,染色时均需微波修复抗原。实验中采用PBS代替一抗作为阴性对照,光镜下观察阳性反应呈棕黄色。 表1胃癌组织中eIF4E和cyclinD1的表达与临床病理特征的关系(略) 1.3结果判定 eIF4E阳性细胞为细胞浆深染成棕黄色颗粒,cyclinD1阳性细胞为细胞核深染成棕黄色颗粒;在此基础上,参照文献判断标准[3,4],以阳性细胞数<10%为阴性表达,阳性细胞数≥10%为阳性表达。 1.4统计学处理 采用SPSS11.0统计软件包进行分析。计数资料用χ2检验和四格表确切概率法以及计数
5、资料的相关性分析。以P<0.05为显著性检验水准。 2.2胃癌组织中cyclinD1表达 cyclinD1阳性染色主要见于胃癌细胞的胞核。在检测的91例胃癌中cyclinD1阳性表达者达77例,阳性表达率为84.6%;而30例正常胃粘膜组织中均未见阳性表达;二者差异有显著性(P<0.01)。cyclinD1阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05),而与患者年龄、性别以及肿瘤分化程度均无明显相关性(P>0.05),见表1。 2.3胃癌组织中eIF4E与cyclinD1表达的关系 对胃癌
6、组织中eIF4E与cyclinD1表达水平进行相关性分析,eIF4E阳性表达的87例胃癌中,77例cyclinD1阳性表达;eIF4E阴性表达的4例胃癌中无1例阳性表达,表明cyclinD1与eIF4E表达呈非常显著正相关(P<0.01,r=0.780),见表2。 表2胃癌中cyclinD1与eIF4E表达的关系(略) 3讨论 eIF4E基因是近年来发现的又一重要原癌基因,其编码25kD的蛋白eIF4E,是eIF4F复合体(eIF4E、eIF4A、eIF4G)的一部分,可特异性地与真核细胞mRNA的5’末端帽结构结合,参与mRNA
7、的翻译,在帽依赖的翻译起始阶段起限制调控作用[5]。eIF4E的过度表达不仅能促进细胞的增殖反应,而且更能促进细胞的恶性转化[6]。近年来研究发现,eIF4E过度表达与恶性肿瘤的发生及发展有关。Norton等[1]在人乳腺癌中发现eIF4E的过度表达,且不存在于乳房良性组织。Liang等[7]报道喉鳞癌中检测到eIF4E过度表达,而正常组织无eIF4E过度表达。本研究发现,胃癌中有95.6%的标本有eIF4E的阳性表达,而正常胃组织中无1例阳性表达,两者相比差异有显著性(P<0.01),且eIF4E阳性表达率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移以
8、及TNM分期有关(P<0.05)。提示eIF4E基因表达上调与胃癌的形成密切相关,并随着本病恶化程度的增加而持续增加,其表达水平对评价胃癌的恶性程度有一定价值
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