紫苏属植物叶片氨基酸组成及含量分析论文

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1、紫苏属植物叶片氨基酸组成及含量分析论文.freelg/g，氨基酸总量为57.65mg/g，综合表现优良。试验结果还表明，野生紫苏的药效氨基酸和香甜味氨基酸含量均相对较高，是紫苏属植物中氨基酸含量丰富的资源。关键词：紫苏；氨基酸；HPLC法1材料和方法1.1供试材料试验共27份紫苏属植物材料.freelax型离心机，Millipope公司MilliQ型纯水仪，Labarey公司微量移液器Autoseienee公司溶剂过滤器，上海精科雷磁公司PHS一2C型酸度计。乙腈、甲醇、四氢呋喃均为色谱纯，由T

2、EDIA公司提供，内标物SAR和17种氨基酸混合标样（含AspGluSerHisGlyThrAlaArgCys-SS-CysTyr、Val、Met、Phe、Ile、Leu、Lys、Pro）以及衍生剂OPA和FMOC均由Agilent公司提供，其余试剂为分析纯。1.3方法1.3.1供试样品的制备采取3个月生植株上的完整健全叶片，在80℃干燥箱中烘干，粉碎，准确称取0.5g于10mL安瓿瓶中，加入6mol/L的HCl7mL，充入高纯N2，将安瓿瓶封口，置于105℃恒温干燥箱中消化过夜。冷却后过滤，滤液

3、浓缩近干，加5mL0.1mol/L的HCl溶解，取1.5ml至1.5ml离心管中，10000转/min离心10min，取上清液900ul加入100ul5nmol/ul内标物SAR，混匀后作为供试样品。1.3.2标准溶液的制备5nmol/L内标液制备：精密称取SAR22.3mg以0.1mol/LHC1定容至50mL。500pmol/L内标液制备：精密吸取5nmol/L内标液5mL以0.1mol/LHC1定容至50mL。900pmol/L氨基酸混合标液制备：精密吸取900ul1000pmol/L氨基

4、酸混合标液加入5nmol/L内标液100ul；225pmol/L氨基酸混合标液制备：精密吸取900ul250pmol/L氨基酸混合标液加入5nmol/L内标液100ul；90pmol/L氨基酸混合标液制备：精密吸取900ul100pmol/L氨基酸混合标液加入5nmol/L内标液100ul。1.3.3色谱条件样品自动柱前衍生化程序：吸取硼酸缓冲液5ul，再吸取OPA试剂1ul，洗针1次，吸取样品1ul，原位混合6次。吸取FMOC试剂1ul，洗针1次，原位混合3次，进样。色谱柱：Hypersil

5、AA-ODSC182．1×200mm流动相A：醋酸钠1.36±0.025g，加入纯水500mL溶解，加EDTA溶液50ul，再加三乙胺90ul，用1％-2％醋酸调pH=7.20±0.05，再加入四氢呋喃1.5mL，混合均匀。流动相B：醋酸钠1.36±0.025g，加入纯水100mL溶解，用1％一2％醋酸调pH=7.20±0.05，将此溶液加至乙腈200mL和甲醇200mL的混合物中，并混合均匀。柱温：40℃紫外检测波长：338nm；梯度洗脱：流动相A：以0.45ml/min在0-17min由10

6、0%减至40%，17min-18min由40%减少至0；流动相B：以0.45ml/min在0-17min由0增至60%，17min-18min由60%增至100%，18.1min-23.9min流速由0.45ml/min-0.80ml/min，运行至24min结束。1.3.4测定方法和数据处理分别精密量取对照品溶液和供试样品各1ul，注入液相色谱仪，记录色谱图至脯氨酸峰出峰后即得。以3种浓度的标样制作校正表，按Agilent公司提供的氨基酸分析软件包进行数据处理。2结果与分析2.1紫苏属植物

7、叶片中氨基酸组成及含量比较27份材料叶片中均测得17种氨基酸，其氨基酸种类较齐全。所测氨基酸中以甘氨酸平均含量最高，达6.68mg/g，其次是亮氨酸和谷氨酸，分别为4.77mg/g和4.59mg/g。与人体健康关系最为密切的赖氨酸平均含量有1.87mg/g。7种必需氨基酸总量平均为14.58mg/g，占氨基酸总量的比例为32.43%。氨基酸总量超过50mg/g的材料共有6份（P06-11紫、P06-6、P06-7、P06-12紫、P06-15紫、P06-13），其中材料P06-7氨基酸总量最高，达5

8、7.65mg/g，较总含量最低的材料P06-33多23.07mg/g。17种氨基酸中有9种氨基酸（天冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸）含量均以P06-7最高，而有6种氨基酸（丝氨酸、甘氨酸、酪氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸）含量的最低值出现在P06-33中。必需氨基酸含量变化范围在11.10-19.55mg/g之间，仍以P06-7为最高。非必需氨基酸含量的变化趋势与氨基酸总量的变化趋势大致相同。食