板蓝根高极性部位增强f022抗内毒素活性的研究

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1、板蓝根高极性部位增强F022抗内毒素活性的研究作者：林爱华，刘奕明，丘小惠，刘云海【关键词】板蓝根摘要：目的研究板蓝根高极性部位（Ftp）与板蓝根F022部位协同抗内毒素作用。方法ELISA法检测内毒素刺激鼠腹腔巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）水平，内毒素致BCG增敏小鼠死亡实验。结果Ftp联合F022处理巨噬细胞，能显著抑制TNF-α和IL-6水平，效果优于单用F022组；Ftp联用F022显著延长BCG增敏小鼠受内毒素攻击后的存活时间。结论Ftp本身抗内毒素活性较弱，但与F022部位合用，可进一步增强F022

2、部位的抗内毒素作用。关键词：板蓝根；抗内毒素活性；TNF-α；IL-6Top-polarFractionDevelopingAnti-endotoxinActivityofF022fromRadixIsatidisAbstract:ObjectiveTostudytheanti-endotoxinsynergisticeffectoftop-polarfraction(Ftp)andF022fromRadixIsatidis.MethodsTheproductionofTNF-αandIL-6ofmurineperitonealmacroph

3、agesstimulatedbyLPSeasuredbyELISA.ThelethalityofBCG-primedmiceultaneouslytomacrophagesculture1hbeforeadditionofLPS,Productionarkablyinhibited.FtpandF022remarkablyprotectedBCG-primedmicefromLPSinducedlethality.ConclusionTheseresultssuggestthatFtpcandeveloptheanti-endotoxinac

4、tivityofF022fromRadixIsatidis.Keyg/支，Sigma公司产品)；卡介苗（BCG，50mg/支，上海生物制品研究所）；TNF-α和IL-6试剂盒（北京邦定泰克生物有限公司）；新生小牛血清（NBS，批号981128，沈阳安迪生物高科技公司）。RPMI-1640细胞培养液（GIBCO公司）；0.9%氯化钠注射液（NS，批号000429，连云港制药厂）；层析硅胶（100~200目，青岛海洋化工厂）；氯仿、甲醇、石油醚等均为分析纯。1.2主要仪器1815TC型CO2培养箱，Shel-Lab公司产；MK3型酶标仪，Labs

5、ystemDragon公司产。1.3动物C57BL/6小鼠(♀，6～8周龄，体重17~19g)，由同济医学院器官移植研究所提供。昆明种小鼠（♂，体重18~22g），由同济医学院实验动物中心提供，均为清洁级。1.4Ftp、F022的提取Ftp提取板蓝根，粉碎，用石油醚回流提取3次，过滤，弃去滤液，残渣晾干；再依次用醋酸乙酯、氯仿提取；最后残渣用水提取3次，合并滤液，减压浓缩，得浸膏，收率为1.8%。F022的提取参见1.8内毒素致BCG增敏小鼠死亡实验每只小鼠按100mg・kg-1iv给予BCG，10d后，随机分为4组，每组20只

6、，分别为模型对照组、Ftp（25g生药・ml-1）组、F022（25g生药・ml-1）组、Ftp（25g生药・ml-1）+F022（25g生药・ml-1）组。每20g灌胃0.4ml，1.5h后，静脉给予LPS4mg・Kg-1，分别在3，5，10，24，36，48h内观察小鼠死亡情况，与对照组作统计学χ2检验。2结果2.1Ftp对LPS处理巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6的影响结果表明，Ftp抑制巨噬细胞分泌TNF-α和IL-6能力较弱；Ftp+F022处理方式能显著抑制TN

7、F-α和IL-6的分泌，效果优于Ftp组和F022组。见表1。表1Ftp、F022对LPS所致鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF-α（略）2.2Ftp对LPS致BCG增敏小鼠死亡的保护作用对照组小鼠受LPS攻击后10h出现死亡高峰，死亡率达70%。Ftp、F022均能延长BCG增敏小鼠受LPS攻击后存活时间，但Ftp部位不及F022部位的作用，两部位合用则显著提高该保护作用，延长生存时间。Ftp、F022、Ftp+F022组的BCG增敏小鼠受LPS攻击后死亡率分别为50%，25%，15%。见表2。表2Ftp、F022对LPS所致BCG增敏小鼠死亡的保护

8、作用（略）3讨论内毒素性疾病的防治研究是近十几年来国际医药学界研究最为活跃的领域之一。内毒素是内毒素性疾病的发病、加重或影响预后的主要病因之一，由其所致的败血症休克