板蓝根f部位抗内毒素分子机理研究_论文

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1、板蓝根F022部位抗内毒素分子机理研究作者：林爱华，刘云海，刘奕明【关键词】板蓝根；,,F022部位；,,内毒素；,,分子机理摘要：目的探讨板蓝根F022部位抗内毒素分子机理。方法内毒素定量检测法测定F022样品液对内毒素的破坏作用；研究样品液对内毒素致鼠巨噬细胞分泌炎性因子的抑制作用、对蛋白激酶MAPKp38活性的影响、对内毒素刺激鼠组织moesinmRNA分子表达及对内毒素诱导鼠体内TNFα,IL6和NO的抑制作用。结果1%F022对内毒素破坏率达到%，F022能显著抑制内毒素刺激巨噬细胞分泌TNFα，IL6水平；抑制内毒素刺激蛋白激酶MAPKp38活性；降低内毒素刺激鼠肝、肾、

2、脾组织moesinmRNA和体内TNFα，IL6和NO等炎性因子的表达。结论F022部位不仅直接破坏内毒素结构，且阻断内毒素引起的信号传导通路，从而抑制机体炎性因子的过度释放、抑制膜结构伸展刺突蛋白和丝裂原活化蛋白激酶的表达，从分子水平阐明了板蓝根中活性部位F022抗内毒素的分子机理。关键词：板蓝根；F022部位；内毒素；分子机理StudiesontheAntiendotoxicMolecularMechanismofF022fromRadixIsatidis12/12Abstract：ObjectiveTostudytheanti-endotoxicmolecularmechani

3、smofF022fromRadixIsatidis.MethodsThecontentofF022pretreatedETwasquantitativelydeterminedwithlimulustest．TheinhibitionofTNFαandIL6ofmurineperitonealmacrophagesstimulatedbyLPS,themolecularexpressionofmoesinmRNA,MAPKp38,TNFα,IL6andNOinmicetissuesinducedbyLPSwerestudiedontheantiendotoxicmechanismof

4、F022.ResultsItwasfoundthattheETreductionratewas%,if1%F022wasaddedtomacrophagesculturebeforeadditionof50ng・ml1LPS．ProductionofTNFα,IL6andMAPKp38bymacrophageswereinhibitedinvitro．F022remarkablydecreasedthemolecularexpressionofmoesinmRNAinliver，kidney，spleeninducedbyLPSinmiceandinhibitedproduction

5、ofTNFα,IL6andNOinmicestimulatedbyfromRadixIsatidiscannotonlydestroythestructureofendotoxin,butalsoobstructthesignaltransductionpathwaysofLPS.F022maybeastrongantiendotoxinfractionindrugsresearchanddevelopment.12/12Keywords：RadixIsatidis;F022fraction;Endotoxin;Molecularmechanism内毒素(endotoxin，ET)是

6、革兰氏阴性菌细胞壁外膜中的脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)成分。可刺激机体防御系统过度释放炎性因子肿瘤坏死因子(TNFα)、白细胞介素6(IL6)及一氧化氮(NO)等而引起发热、脓毒性休克、弥漫性血管内凝血(DIC)、多器官功能衰竭综合征(MODS)，以至死亡。中医对内毒素性疾病的早期表现常辨证为“实热证”，内毒素是“热毒、邪毒”的物质基础［1］。有关内毒素的研究一直是世界生物医学研究热点，而内毒素拮抗药的研究则是防治内毒素性疾病的重要策略之一。先前研究已证实板蓝根有抗大肠杆菌O111B4内毒素作用［2，3］，我们从中筛选出抗内毒素活性强的F022部位［4，5］

7、，为进一步探讨F022部位抗内毒素机理，本文研究了F022部位对内毒素致体内外分泌TNFα，IL6和NO的影响及对内毒素受体-膜结构伸展刺突蛋白(moesin)和内毒素介导的胞内信号传导过程中丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatingproteinkinases，MAPK)p38激酶的影响。现报道如下。　　1器材药品与试剂F022部位（本室制备）,冻干细菌内毒素工作标准品(E．coli12/12O111B4，卫生部上海生物制品研究所，120EU