干化学法测定血氨的临床意义

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1、干化学法测定血氨的临床意义刘果霞杨丽薄晋魏白强(ti头医学院第一附属医院检验科014010)【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)13-0391-02【关键词】血氨干化学法人体内血氨含量极微,体内氨是蛋白质代谢过程中通过氨基酸脱氨基形成,大部分在肝脏内通过鸟氨酸循环合成尿素。血液中氨的来源主要为肠道中细蘭分解尿素和由氨基酸脱氨所生成。此外,组织细胞中有多种脱氨酶,能使蛋白质、核苷酸脱氨而生成氨。在正常情况下,氨的主要去路是在肝脏通过鸟氨酸循环合成尿素。此

2、外,脑和肾脏等器官的氨与谷氨酸作用生成谷氨酰胺后被运输到肝脏,在肝脏转变成尿素或其它含氮化合物后由肾脏排出体外,或形成铵盐随尿排出。是蛋白最终代谢产物。一、血氨特性氨对人体有毒,能影响祌经细胞的新陈代谢。对人体的中枢祌经有潜在的毒副作用,血氨的来源增加和去路减少,都会引起血氨增高。血氨测定对肝性脑病,肝硬化末期肝昏迷,肝衰竭的诊断和鉴别诊断有极其重要的意义,对急性/亚急性肝坏死和雷氏综合症[1]。高血氨症在饮食蛋白过多摄入时也有发现。二、影响血氨的因素1、吸烟者是血氨假阳性增高的主要原因,采血前

3、一天午夜后禁止吸烟,严重者采血前应淋浴。2、实验室周围环境,空气是氨标木污染的主要原因必须通过化学处理。3、血氨测定应用血浆[2],不能血清做标木。血液在凝固过程中会产生氨,抗凝剂可用非铵盐的肝素,EDTA和草酸盐三(U,K,Na)、不能用肝素胺,氟化物。4、采集标木后15分钟内测定,滞留15分钟就可引起血氨增高,最多30min内检测完成。显著溶血不能用来测定。5、如超出测定系统线性范围,可用去氨水稀释血浆后重新测定。三、标本;集血氨测定的准确性在很大程度上取决于标本的留取收。1、应用加抗凝剂的

4、密封负压管采集。防止环境中的氨污染标本2、低温离心5min:取血浆迅速测定,30min内检测完成。3、如不能立即测定,2〜4°C可保留2h,-2(TC可稳定24h。4、红细胞氨浓度是血浆的2.8倍,故标本应禁止溶血,溶血可使红细胞内的氨进入血浆。红细胞和血小板中的γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、谷丙转氨酶(ALT),可引起血氨的浓度的自然增加,在0、20、37°C吋,氨平均增加的比率分别是3.9±0.23、5.2±0.23、25.2&plusm

5、n;0.59umol/L/h,在肝病吋γ-GT和的ALT活性比正常人的增加很多,γ-GT是血氨测定引起标本氨浓度增加的一个主要因素。为了降低血标本在放置中氨的增加,测定出标本中真实的氨含量,可在血标本中加入γ-GT抑制剂,如6-二氨基-5氧-L-己氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucin)或硼砂加丝氨酸等。四、血氨的测定方法1、原理:血氨测定干片(比色法)方法通过生化系统上使用血氨测定干片和血氨与脑脊液蛋白复合物校准品来完成。血氨测定干片为途覆

6、在聚酯基材上的多层分析成分。将一滴患者样本滴在干片上,并通过扩散层均匀地分布到下面的试剂层。水和非蛋A组分扩通过,散到下面的缓冲试剂层,氨离子转化为气态氨。半透明只允许氨通过,并且阻止缓冲液或氢氧基离子到达指示剂层。经过固定的孵育吋间后便可将扩散层作为白色背景测定显色剂的反射强度。2、反应步骤:NH3+溴酚蓝(氨指示剂)一蓝染剂3、参考值:9-33umol/Lo干扰物:33.3mmol/浓度葡萄糖可以导致8-40umol/L的氨浓度降低。五、临床意义1、正常情况下氨在肝脏中转变为尿素,重症肝病吋

7、尿素生成功能低下、门静脉侧支循环增加、先天性鸟氨酸循环的有关酶缺乏等。使血氨增高。血氨的测定主要用于肝&迷(肝性脑病)的诊断以及疗效观察[3]。肝硬化末期,急性亚急性肝坏死和雷氏综合症血氨也会增高。门脉高压,经肠道吸收氨未经门静脉入肝脏解毒直接进入大循环血氨增高。2、消化道出血,使肠道内含氮物质增高,经细菌或酶的作用产生大量3、尿毒症,肾功能不好尿素排出减少使血氨增高。4、高蛋白饮食,便秘者(青少年)血氨也会增高。5、血氨低于100umol/L时,患者表情多正常。血氨在100-200umol/L

8、之间时,可能表现为兴奋,行为性格异常,呕吐喂养困难,厌食高蛋白的倾向。血氨200umol八以上吋,出现意识障碍,惊厥。血氨400umol八时将出现昏迷,呼吸困难。当血M增高时,M能降低大脑内的ATP水平,进而影响神经元的功能。有关专家研究[4],对44例急性肝衰竭(ALF)动脉血氨浓度和脑疝形成的关系进行了研究,14例急性肝衰竭脑水肿形成脑疝患者动脉血氨水平为230±58umol/L,30例无脑茹形成忠者动脉血氨浓度为118±48umol/L,明显低于有脑疝形成者(P

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