天参益智方对老年性痴呆模型大鼠神经细胞凋亡的抑制

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1、天参益智方对老年性痴呆模型大鼠神经细胞凋亡的抑制【摘要】目的研究天参益智方（TSYZ）对AD模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用和抗氧化作用。方法以慢性铝中毒法复制老年性痴呆模型大鼠，用TUNEL法观察模型大鼠海马和皮质内细胞凋亡水平，并检测脑线粒体超氧化物歧化酶（SOD）活性以及丙二醛（MDA）含量。结果模型组大鼠海马和皮质具有典型的细胞凋亡特征，T-SOD活性降低，MDA含量升高；而天参益智方治疗组海马和皮质神经细胞凋亡数减少，T-SOD活性升高，MDA含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论天参益智方具有明显抑制神经细胞凋亡作用和抗氧化作用

2、，其改善AD大鼠学习记忆功能可能是通过多个环节整体治疗来实现的。【关键词】天参益智方老年痴呆细胞凋亡超氧化物歧化酶丙二醛　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofTSYZformulaonneuronalapoptosisandanti-oxidationofageddementiamodelmice.MethodsTheageddementiamodelsi.gAlCl3.TUNELarkedlycausedinmodelgroup,meanarkably.TheTSYZformulagroupsobviouslyinh

3、ibitedneuronalapoptosis,increasedtheactivityofSODandloulaonneuronalapoptosisandanti-oxidationareremarkable.ThemachanismsmaybethattheprotectiveeffectsofTSYZformulaontheabilityoflearningandmemoryofADmodelmice.　　Keyula;Ageddementia;Neuronalapoptosis;SOD；MDA　　老年性痴呆（Alzheimer'sdisease,

4、简称AD）是一种严重影响老年人身心键康的，以进行性智力减退为特征的中枢神经系统退行性疾病，这种病的典型症状是记忆损伤,随着病情恶化,会出现行为的紊乱和个性的变化。据统计,在我国60岁以上人口中AD的患病率占5%,约600万［1］，随着我国人口老龄化，老年痴呆症患者将日益增多，且发病年龄有提前趋势，因而老年痴呆症将成为本世纪威胁人类健康最严重的疾病之一，同时也将给我们带来沉重的社会和经济负担。因此，寻找治疗老年性痴呆症的有效药物，已成为医药领域的研究热点之一。天参益智方具有补脾益气、补肾填精、养血安神、平肝熄风、活血化淤、豁痰开窍等功效，其成分主要有天麻、人

5、参、石菖蒲等。在先前的实验中,我们发现天参益智方对AlCl3所致AD模型大鼠的学习记忆能力有明显的改善作用，且能阻止Aβ在海马和皮质中的合成和沉积，本实验进一步研究天参益智方对AD模型大鼠神经细胞凋亡的抑制作用及其抗氧化作用。　　1器材　　1.1药物天参益智方，棕褐色粉末，由本院分析教研室提供。　　1.2动物SD健康大鼠60只，体重（200±20）g，雌雄兼备，由贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号：SCXK(黔)2002-0001。　　1.3仪器与试剂Biomias99图象分析系统（四川大学图象图形研究所产品）；EG1160石蜡包埋机(德国Leica公司

6、生产)；RM2145轮转切片机(德国Leica公司生产)；HI1210摊片机(德国Leica公司生产)；721分光光度计（上海第三分析仪器厂）；XH-B漩涡混匀器（江苏康健医疗用品有限公司）；HH-2数显恒温水浴锅（金坛市富华仪器有限公司）；三氯化铝（AlCl3·6H2O）（分析纯，上海盛龙化工有限公司生产）；脑复康(杭州民生药厂生产)；TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒、即用型SABC、DAB显色试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司产品）；SOD试剂盒、MDA试剂盒（南京建成生物工程有限公司产品）　　2方法　　2.1痴呆模型建立［2～4］，实验分组及药物治疗S

7、D健康大鼠60只，随机分为正常对照组（n=10）和模型组（n=50）。模型组给AlCl3溶液，第1个月和第2个月按500mg·kg-1·d-1灌胃，以后一直自由饮用1.6g·L-1AlCl3溶液；正常对照组灌胃等容的蒸馏水，用水迷宫法检测其记忆改变情况。痴呆模型建立成功之后，模型组随机分为5组，每组10只，即脑复康组，天参益智方高、中、低剂量组和痴呆模型组，以上药量均配成0.6ml液体灌胃给药,连续3个月，正常对照组、痴呆模型组灌以等体积的蒸馏水。整个实验过程避免与铝制品接触。　　2.2标本制备水迷宫测试结束24h后，大鼠断头取脑，用10%中性缓冲液福尔马

8、林固定4h以上，石蜡包埋作连续冠状切片，片厚5μm。　　2.3神经