hplc法测定法在不同产地药材陈皮中橙皮苷含量测量中的运用

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1、HPLC法测定法在不同产地药材陈皮中橙皮苷含量测量中的运用摘要：目的：运用HPLC法测定法对不同产地药材陈皮中橙皮苷含量进行测量。方法：应用DiscoveryC18色谱柱，使用的流动相为甲醇、冰醋酸、水，彼此之间的比例为35:5:60,通过检测最适宜的波长为283nm,最适宜的流速应该是1.Oml/min。结果:橙皮苷处于21.43-2143Ug/ml之间时，拥有比较好的线性关系，平均回收率也非常高，迖到了98.78%，结果表明，药材陈皮产地不同，橙皮苷含量也有一定的区别。结论：运用PLC法来对不同产地药材陈皮中橙皮苷

2、含量测量具有非常突出的优势，简单快捷，具有非常好的准确性，而且重复性也非常好，值得推广应用。关键词：HPLC法；陈皮；橙皮苷；运用我国多地都有种植陈皮，比如福建、广东等地。陈皮是一味中草药，主要功能有理气健脾、燥湿化痰等，主要用来治疗食少吐泻、胸闷等疾病。陈皮中最重要的成分就是橙皮苷。很多研究者应用紫外分光光度法对陈皮中的橙皮苷进行检测，效果不佳，尤其表现在专属性差。有报道称，运用HPLC法测定陈皮中橙皮苷含量测量具有非常好的效果。为此本文采用HPLC法，对来自于6种不同产地的陈皮中的橙皮苷进行测定。1仪器与试药1.1

3、仪器美国，Discovery,C18色谱柱（4.6mmX250mm，5um）,美国Water717,高效液相色谱仪器，紫外检测器为，SPD-lOAvp,美国梅特勒-托利多，AL204,分析天平（精确度，O.OOOlg），郑州宏朗DZKW-D-6，型电热恒温水浴锅，济宁万和，Model,C9860A,超声波清洗脱气机器，河北，DZF-6021,型真空干燥箱。1.2试剂：甲醇溶液为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为三蒸水。1.3试药：橙皮苷对照组（购于中国药品生物制品检定所，批号：130825-200921），6，批不同产地陈皮

4、药材均购于各地方的药材公司，经我当地药品检验所鉴定均为正品。2方法与结果2.1色谱条件应用DiscoveryC18色谱柱，将甲醇：冰醋酸：水=35:5：60,作为流动相，检测波长确定为283nm,流速确定为1.0mL/min，色谱柱温度确定为25上°（3,进样量确定为20ML。2.2溶液制备2.2.1制备对照品溶液。运用天平称取5mg橙皮苷，该对照品必须要经过P205,再通过室温减压，而后再进行干燥24h才可使用，将对照品放入到25uL容量瓶中，而后添加甲醇溶液，待到指定刻度后，摇晃均匀，静置一段时间后，即得到对照品溶

5、液。选择应用精密仪器称取对照品溶液，共5pL,而后将流动相溶液放入到25uL容量瓶中，摇晃均匀，静置一段时间后，过0.22pm滤膜，而后将其放到冰箱中，冰箱温度为-20°C，储备起来以待日后应用。2.2.2制备供试品溶液。将来自于福建、广东、四川、广西、浙江、湖南等六地的药材陈皮分别放入到粉碎机中，待到粉碎结束后，再将其放入到电热恒温干燥箱中，箱中温度要迗到55°C,干燥时间为6h。应用相关仪器精密称取各个产地陈皮粉碎品各2g，而后加入160pL石油醚溶液，使用超声仪器超声45min,将所有的石油醚过滤出来。待到药渣挥

6、干后，再加入到不同容量的甲醇溶液中，分别为60uL、60uL、40uL,再进行超声提取，共3次，每次45min。完成过滤后，研究者需要将过滤液合并，待到甲醇溶液达到指定要求的200UL时，摇晃均匀，应用微孔滤膜进行过滤，最后得到了供试品溶液，将其放到冰箱中备用，冰箱温度调到-20°Co2.3系统适应性研究2.3.1研究者需要根据制备供试品溶液的步骤进行制备阴性对照液制备。2.3.2系统适应性。依据上述要求的色谱条件，研究将上述三种溶液进行精确提取，每个溶液各20uL。，供试品中橙皮苷与相邻杂质分离度〉1.5,阴性对照溶

7、液与橙皮苷对照品相同保留时间处未见色谱峰，认为不干扰实验测定结果。理论塔板数按照橙皮苷峰计算不低于，3000。2.4线性关系考察按照对照品溶液，精密吸取对照品，溶，液，l.Oul、2.0y1、4.0u1、6.01、8.0u1、lO.Oul、12.0uK14.Oub16.Oub20.Oul,进样量为，20.Oul,不足，20ul,体积均采用流动相溶液进行补充，分别注入高效液相色谱仪器中，按照色谱条件进行测定，记录峰面积，以峰面积作为纵坐标（Y），橙皮苷进样浓度作为横坐标（X），绘制线性关系方程，得线性回归方程为：Y=1.

8、8069X106X+l.8056X104,（r,=0.9996），，橙，皮，苷，在21.43〜2143ug/ul，范围内呈良好的线性关系（这个应该没办法加入到论文中解释，根据方程可以得到一条直线，根据论文研究的需要进行橙皮苷浓度的选择，也可以选择其他浓度范围，只要是满足线性关系方程即可）。2.5精密度实验精密量取橙皮苷对照品溶液2