HPLC法测定菌毒清颗粒中丹酚酸B的含量.doc

《HPLC法测定菌毒清颗粒中丹酚酸B的含量.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、HPLC法测定菌毒清颗粒中丹酚酸B的含量作者：范辉，宋粉云，钟兆健，肖若媚【摘要】目的测定菌毒清颗粒中丹酚酸B的含量。方法采用反相高效液相色谱法，DiamonsidTMC18柱，甲醇-乙腈-0.5%甲酸（体积比31∶10∶59）为流动相，流速为1.0mL·min-1，检测波长286nm，柱温为30℃。结果丹酚酸B平均回收率为101.5%，RSD为1.95%（n=6）。结论该法可用于菌毒清颗粒中丹酚酸B的含量测定。【关键词】菌毒清颗粒；丹酚酸B；HPLC；含量测定　　Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentofSalvian

2、olicacidBinJunduqinggranules.MethodsARP-HPLCmethodwasestablished.ThechromatographiccolumnwasDiamonsil-C18.Themobilephasewasmethanol-acetonitrile-0.5%formicacid（31∶10∶59）Theflowratewas1.0mL·min-1,andthedetectionwavelengthwas286nm.ResultsTheaveragerecoveryforsalvianolicacidBwas101.5%,

3、precisionofthemethodwas1.95%(RSD,n=6).ConclusionThemethodcanbeusedforquantitativedeterminationofJunduqinggranules.　　Keywords:Junduqinggranules；salvianolicacidB；RP-HPLC；Assay　　菌毒清颗粒是医院制剂，由板蓝根、穿心莲、玄参、茜草、丹参、金银花提取制成，具有清热解毒、抗菌消炎、抗病毒作用。临床用于治疗细菌、病毒感染疾病，如呼吸道、胃肠道、泌尿系统的感染EB病毒阳性的患者。该产品现行标准只收载了

4、定性鉴别反应，有文献报道采用HPLC法测定其中穿心莲内酯、哈巴俄苷的含量［1,2］，但丹酚酸B含量测定未见文献报道。为进一步评价菌毒清颗粒的质量，本文建立了菌毒清颗粒中丹酚酸B含量测定的反相高效液相色谱法，该法具有分离效果好、灵敏、准确等优点，可用于该产品的质量控制。　　1仪器与试药　　　　Agilent1100高效液相色谱仪（安捷伦公司），Agilent1100系列双元泵，Agilent1100可变波长检测器，Agilent1100/化学工作站。DL-360超声波清洗器（宁波石浦海天电子仪器厂），工作频率(4.5±0.05)kHz，输出功率240W。　　　　

5、丹酚酸B对照品（中国药品生物制品检定所，111562-200504），菌毒清颗粒（中山市人民医院），甲醇、乙腈为色谱纯，甲酸为分析纯，水为双蒸水。　　2方法与结果4　　2.1样品液制备　　2.1.1对照品溶液的制备精密称取五氧化二磷减压干燥器中干燥24h的丹酚酸B对照品10.00mg，置50mL棕色量瓶中，加体积分数为75%的甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密移取10mL，置50mL棕色量瓶中，用体积分数为75%的甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液（浓度为40μg·mL-1）。　　2.1.2供试品溶液的制备精密称取菌毒清颗粒样品约4g，置具塞锥型瓶中，精密加

6、入体积分数为75%的甲醇25mL，称定重量，超声处理30min，放冷，称重，用体积分数为75%的甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，续滤液0.45μm滤膜过滤，作为供试品溶液。　　2.1.3阴性对照液的制备取处方组成中除丹参外的其余成分制成不含丹参的阴性对照品，按“2.1.2”项下的制备方法处理得阴性对照液。　　2.2色谱条件及系统适用性试验色谱柱为Diamonsil-C18柱（250mm×4.6mm，5μm，迪马公司），甲醇-乙腈-0.5%甲酸（体积比31∶10∶59）为流动相，流速为1.0mL·min-1，检测波长286nm，柱温为30℃。分别取对

7、照品溶液（丹酚酸B浓度为12μg·mL-1）、供试品溶液和阴性对照溶液10μL注入色谱仪，理论板数以丹酚酸B计算应不低于5000；丹酚酸B的拖尾因子为0.94，保留时间约为25min，丹酚酸B与其他组分可基线分离；阴性样品不干扰样品测定（图1）。　　1.丹酚酸BA.对照品B.样品C.阴性样品　　图1丹酚酸B对照品、样品及阴性的高效液相色谱图（略）　　Fig1HPLCchromatogramsofsalvianolicacidB(A)andsample(B)andnegative(C)　　2.3方法学考察　　2.3.1标准曲线制备分别吸取一定量的丹酚酸B对照品贮

8、备液，加体积分数为75%的甲醇稀释成丹