α干扰素对人肺腺癌a549细胞生物学行为的影响

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1、α干扰素对人肺腺癌A549细胞生物学行为的影响作者：姜纯国，孙思庆，朱晓莉，林勇【摘要】　　目的：研究IFNα对人肺腺癌A549细胞株克隆形成、迁移和侵袭能力以及细胞凋亡的影响。方法：用不同浓度（100、500、1000、2000U·ml-1）IFNα处理人肺腺癌A549细胞（实验组），以未经药物处理细胞作对照(对照组)，平板克隆形成实验观察两组细胞克隆形成能力的差异，Transwell小室实验观察两组细胞迁移和侵袭能力的差异，流式细胞仪观察两组细胞凋亡水平的差异。结果：IFNα能够明显降低人肺腺癌A549细胞克隆形成、迁移和侵袭能力，诱导细胞的凋亡，而且在一定范围内与

2、药物浓度成正相关(P＜0.05)。结论：IFNα在非小细胞肺癌临床治疗中可能有潜在价值。【关键词】干扰素α；人肺腺癌细胞；生物学行为　　［Abstract］Objective：Tostudytheinfluenceofinterferonα(IFNα)onthecolonyformation,migration,invasionandapoptosisofhumanlungadenocarcinomaA549cellline.Methods：HumanlungadenocarcinomaA549cellsweretreatedwithaconcentrationof10

3、0,500,1000,2000U·ml-1IFNα,respectively.Theabilityofcellcloneformationwas9detectedbytheplatecolonyformingassay.ThecellmigrationandinvasionabilitywereobservedinTranswellchamber.Theapoptosiswasanalyzedbyflowcytometry.Results：Theabilityofcellcolonyformation,migrationandinvasionweresignificantly

4、reduced.IFNαcouldeinducecellapoptosisinaconcentrationdependentmanner(P＜0.05).Conclusions：IFNαmayhavepotentialvalueinnonsmallcelllungcancertreatment.　　［Keywords］interferonα;lungadenocarcinomacell;biologicalbehavior　　干扰素是一种具有多种生物活性的细胞因子，近年来α干扰素（IFNα）对肿瘤的作用逐渐受到重视。实验表明，在体内外干扰素都能够控制肿瘤生长，抑制

5、肿瘤复发转移，但IFNα对非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移、凋亡能力的影响还不十分确切。本研究的目的是探讨IFNα对人肺腺癌A549细胞的生物学行为影响，为进一步深入了解IFNα的抗肿瘤作用与非小细胞肺癌发病机制之间的关系奠定基础。　　　　1材料和方法9　　1.1材料　　人肺腺癌细胞株A549购自中国科学院上海细胞生物研究所。主要试剂有IFNα（上海生物制品研究所）、RPMI1640培养液(GIBCO公司)、胎牛血清（杭州四季清公司）、胰蛋白酶（GIBCO公司）、Matrigel胶（美国BD公司）、AnnexinVFITC及PI细胞凋亡检测试剂盒（南京凯基生物公司）。主

6、要实验耗材有插入式细胞培养池（Transwell，Corning公司）。　　1.2方法　　1.2.1平板克隆形成实验观察细胞克隆形成能力　　将对数生长期的人肺腺癌A549细胞以750孔-1均匀接种于6孔板中，每孔加2ml培养液，以十字方向轻轻晃动6孔板，使细胞分散均匀。培养24h后分别给予100、500、1000、2000U·ml-1IFNα处理（实验组），并设不加药的对照组。每组设3个复孔，静止培养2周（100、500、1000、2000U·ml-1IFNα处理5d后更换等体积RPMI1640培养液继续培养至2周）。弃去培养液，用PBS洗2次。加甲醇2ml固定10min

7、，弃去甲醇，待其自然挥发至干，加入Giemsa染液10～15min（根据温度而定）；自来水冲去染液，空气干燥。实验重复3次。肉眼直接计数克隆数。9　　1.2.2Transwell小室实验观察细胞迁移能力　　将人肺腺癌A549细胞悬液（5×105ml-1）接种于24孔Transwell小室上层，小室下层放适量小鼠NIH3T3细胞的无血清培养液。实验组在小室上层加入含IFNα（100、500、1000、2000U·ml-1）的RPMI1640培养液，对照组加入等体积RPMI1640培养液，