大鼠脑组织mrna在非洲爪蟾卵母细胞的表达―――外源性gabaa受体与内源性gabaa和gabab受体的比较

《大鼠脑组织mrna在非洲爪蟾卵母细胞的表达―――外源性gabaa受体与内源性gabaa和gabab受体的比较》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、大鼠脑组织mRNA在非洲爪蟾卵母细胞的表达―――外源性GABAA受体与内源性GABAA和GABAB受体的比较【关键词】GABA受体【摘要】目的本文利用在非洲爪蟾卵母细胞表达外源基因的技术，对比研究卵母细胞内源性GABA受体和表达的鼠脑GABA受体，为进一步进行递质与受体的研究奠定方法学基础。方法实验采用Trazol试剂法及oligo-dt纤维素柱过柱法，从20只大鼠脑组织抽提多聚腺嘌呤mRNA，注入非洲爪蟾卵母细胞表达有功能的受体，并利用电压钳方法记录受体激活电流。结果卵母细胞内源性GABA受体和表达的鼠脑GABA受体存在多方面的不同。结论本实验建立的表达模型

2、在研究递质与受体功能、结构、药理学特性等方面起到一定的参考作用。关键词卵母细胞GABA受体双电极电压钳ExpressionofmRNAfromratbraintissueinXenopusoocytesNieHui，ZhangPeihua，WangYubin，etal.TheScienceandTechnologyUniversi

3、ty，MedicineCollegeofWuhan，Hubei430080.【Abstract】ObjectiveTolayamethodologicalgroundworkforstudyingthepropertiesoftransmittersandreˉceptors，thisexperimentaimedtocomparetheendogenousGABAreceptorsandexogenousGABAreceptorsfromratbrainmRNAexpressioninXenopusoocytes.MethodsPoly（A）+mRNAsex

4、tractedfromthebraintissueoftwentyratsweremicroinjectedintodefolliculatedXenopusoocytestoexpressfunctionalreceptors，andvoltageclamprecordˉingtechniquewasusedtorecordGABA-activatedcurrents.ResultsTheresultswereasfollows:1）DifferentconˉcentrationsofGABAevokedoutwardcurrentsinfollicular

5、Xenopusoocyteswithoutreceivingmicroinjection;thecurˉrentsprovedtobemediatedbyGABAbandGABAcreceptorsbutnotbyGABAarecepter.2）Large，inwardcurrentswereevokedbydifferentconcentrationsofGABAinthoseoocytesmicroinjectedwithmRNAfromratbrainandwereblockedbyBicuculline（aGABAareceptorantagonist

6、）.ConclusionTheresultssuggestthatthereexistdiscrepancybetweenendogenousandexpressedGABAreceptorsinoocytesinmanyaspects.ThedistinctionbetweenthesetwokindsofGABArecepterswerecomparedandlistedinatable.KeywordsfollicularXenopusoocyteGABAreceptortwo-electrodevoltage-clamprecording非洲爪蟾卵母细

7、胞是一种巨大细胞，直径可达1～1.2cm。自1971年Gurdon首先将兔的网织红细胞9SmRNA导入其中，成功地表达出珠蛋白后［1］，作为一种功能性表达系统，因其具有操作简单、易培养、表达稳定等优点，卵母细胞表达技术已被国外各实验室普遍应用［2～4］。我们的实验采用非洲爪蟾卵母细胞的受体移植法与双极电压钳技术相结合，研究大鼠脑组织mRNA表达的GABA受体的特性。1材料和方法1.1大鼠脑组织的取材成年SD大鼠20只，2～3月龄，体重150～200g，雌雄不拘。击昏后断头，沿正中线剪开颅骨取出脑组织。用生理盐水小心冲净血液，去除结缔组织。1.2大鼠脑组织RNA

8、抽提技术（1）提取总RNA:提取总RN