突触外gabaa受体的δ、α5亚基在大鼠岛叶癫痫模型海马中的表达

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1、分类号：R6单位代码：10752密级：公开学号：2009178宁夏医科大学硕士研究生学位论文突触外GABAA受体的δ、α5亚基在大鼠岛叶癫痫模型海马中的表达Expressionoftheδandα5subunitoftheGABAAreceptorinthehippocampusinducedbytheinsularepilepsyrats学位申请人：王恩杰指导教师：孙涛教授申请学位门类级别：医学专业名称：外科学研究方向：癫痫的基础与临床研究所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一二年三月宁夏医

2、科大学研究生院NingxiaMedicalCollegeThesisforApplicationofMasterDegreeExpressionoftheδandα5subunitoftheGABAAreceptorinthehippocampusinducedbytheinsularepilepsyratsStudent’sName:WangEnjieSupervisor:Pro.SunTaoSubjectCategory:MedicineMajor:SurgerySpecialty:Basi

3、candclinicalstudyofEpilepsySchool:ClinicalSchoolCompletionDate:March2012宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿

4、＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要突触外GABA

5、A受体的δ、α5亚基在大鼠岛叶癫痫模型海马中的表达摘要目的电刺激Sprague-Dawley大鼠岛叶皮质，建立慢性电点燃模型，观察突触外GABAA受体的δ、α5亚基RNA及相关蛋白在海马的表达变化，探讨突触外GABAA受体的δ、α5亚基在岛叶癫痫发生发展中的作用。为进一步研究岛叶癫痫的发病机制提供理论依据。方法1.动物分组:健康雄性SD大鼠48只，随机分成3组，点燃组、假手术组、正常对照组，每组8只。2.大鼠岛叶慢性电点燃癫痫模型的建立：点燃组、假手术组均在左侧岛叶颗粒细胞皮质植入双极电极，点燃

6、组先测定大鼠的后放阈，从测定后放阈的第二天起每日2次刺激，刺激时间间隔>1h，刺激参数：强度为后放阈1.5倍，频率60Hz，波宽1ms，持续时间1s。假手术组不进行任何刺激。点燃成功后1个月给予同样的刺激参数，观察模型的稳定情况。3.δ、α5亚基在电刺激大鼠岛叶癫痫模型中的表达：无痛处死大鼠，取脑组织标本，应用尼氏染色检测大鼠海马各区神经元的数目，应用免疫组化染色法、实时荧光定量聚合酶链反应研究电点燃大鼠岛叶模型δ、α5亚基相关蛋白和mRNA在海马中的表达。结果1.电刺激大鼠左侧岛叶颗粒细胞皮质

7、成功建立了慢性电点燃癫痫模型，安静状态下自由活动的大鼠以及癫痫发作时大鼠岛叶皮层的脑电变化都被记录到，正常大鼠脑电频率较低，通常在10Hz之内，频率低、能量也低，大鼠Ⅴ级发作时的脑电频率增高到30Hz，并且能量也大大增强。通过一段时间的点燃，大鼠都可达到Ⅴ级，点燃大鼠一个月后给予同样的刺激参数均能达到Ⅴ级发作，说明岛叶癫痫动物模型的稳定性良好。2．点燃成功后7d时，尼氏染色检测表明正常大鼠和癫痫大鼠海马各区神经元数目I宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要的差异无统计学意义（P>0.05）。免疫

8、组化染色法检测表明δ、α5亚基相关蛋白在海马明显降低（P<0.01）。实时荧光定量PCR检测表明δ、α5亚基RNA在海马明显降低（P<0.01）。结论δ、α5亚基可能在岛叶癫痫中起着重要作用；δ、α5亚基可能参与了岛叶癫痫的发生、发展过程中。关键词：岛叶，癫痫，点燃，GABAA受体，亚基II宁夏医科大学硕士研究生学位论文英文摘要Expressionoftheδandα5subunitoftheGABAAreceptorinthehippocampusinducedbytheinsularepil