海马电刺激对海人酸致痫大鼠突触外gabaa受体α5亚基的影响

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1、分类号：R6单位代码：10752密级：公开学号：2010233宁夏医科大学硕士研究生学位论文海马电刺激对海人酸致痫大鼠突触外GABAA受体α5亚基的影响Theeffectsofstimulusonhippocampalofα5SubunitofextrasynapseGABAAreceptorinthekainicacidinducedepilepsyrats学位申请人：申法政指导教师：孙涛教授申请学位门类级别：医学专业名称：外科学研究方向：癫痫基础与临床研究所在学院：临床医学院论文完成日期：二〇一三年四月宁夏医科大学研究生院Ning

2、xiaMedicalCollegeThesisforApplicationofMasterDegreeTheeffectsofstimulusonhippocampalofα5SubunitofextrasynapseGABAAreceptorinthekainicacidinducedepilepsyratsStudent’sName:ShenFazhengSupervisor:Pro.SunTaoSubjectCategory:MedicineMajor:SurgerySpecialty:Basicandclinicalstudy

3、ofEpilepsySchool:ClinicalInstituteCompletionDate:April2013宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权

4、的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（保密论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要海马电刺激对海人酸致痫大鼠突触外GABAA受体α5亚基的影响摘要目的观察海马电刺激对海人酸点燃大鼠海马突触外GABAA受体

5、α5亚基的影响，探讨海马电刺激最佳治疗参数及其对癫痫的可能治疗机制。方法1.动物分组:健康雄性SD大鼠，随机分成5组：癫痫组、假手术组、低频电刺激（LowFrequencyStimulation，LFS）治疗组、高频电刺激（HighFrequencyStimulation，HFS）治疗组、正常对照组。2.建立大鼠海人酸点燃模型：立体定向辅助下将双极刺激电极植入左侧海马CA1区，将注药套管植入右侧海马CA3区。术后7d用微量注射器注入海人酸0.6ul；约30d后，大鼠癫痫发作进入慢性发作期，开始每天8h（8:00-16:00）连续观察大

6、鼠癫痫发作次数，监测大鼠脑电图。3.设置电刺激参数：建模45d后给予电刺激；刺激参数：LFS治疗组（频率1Hz，脉冲双向方波，时间30min，波宽lms，强度100μA，每天1次，连续2周），HFS治疗组（频率130Hz，脉冲双向方波，时间30min，波宽0.2ms，波幅5V，每天1次，连续2周），假手术组不进行任何刺激。4.乙醚麻醉后处死大鼠，取脑组织及海马标本，应用尼氏染色及实时荧光定量PCR(Real-timeQuantitativePCRDetectingSystem,q-PCR)、Westernblot检测各组α5亚基相关m

7、RNA和蛋白在海马中的表达。数据采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验，以P﹤0.05为差异有统计学意义。结果1.海人酸点燃大鼠制模成功率为65%。经过1～2d的急性发作期后，大鼠不再出现癫痫发作，但兴奋性增高，此时大鼠进入静止期；约30d后大鼠出现反复自发的Ⅰ～I宁夏医科大学硕士研究生学位论文中文摘要Ⅲ级癫痫发作，偶有Ⅳ～Ⅴ级发作出现，即进入慢性期。电刺激治疗前模型组大鼠癫痫发作次数之间比较无统计学意义（P>0.05）。2.建模45d后给予海马电刺激，治疗开始的1～5d期间，大鼠兴奋性高，攻击性强，治疗过程中偶可见面肌痉

8、挛、节律性咀嚼以及湿狗样抖动发作；但随着刺激时间的增加，大鼠逐渐表现为安详，未再出现癫痫发作，治疗期间LFS治疗组、HFS治疗组分别与假手术组和癫痫组比较癫痫发作次数明显减少（P<0.01），但LFS治疗组与HFS治疗组