颞叶癫痫大鼠模型海马组织nav1.2的动态表达变化

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1、中南大学博士学位论文颞叶癫痫大鼠模型海马组织Nav1.2的动态表达变化姓名：王美萍申请学位级别：博士专业：神经病学指导教师：肖波20120524八年制博士学位论文中文摘要摘要目的通过监测Navl．2在颞叶癫痫大鼠模型海马组织的动态表达变化，探讨其在颞叶癫痫发病机制中的作用。．方法将6-8周龄健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠，体重250士209，共149只，随机分为实验组和对照组。实验组采用氯化锂一匹罗卡品腹腔注射法建立颞叶癫痫模型；对照组大鼠同期腹腔注射无菌生理盐水。随机抽取实验组6只，对照组3只行手术埋入海马电极，分别于造模前，癫痫持续状态(s

2、tatusepilepticus，SE)时，SE后1天，7天行脑电图监测。其余实验组和对照组按SE后1天、7天、15天、30天、60天分为5个亚组，分别进行：①免疫组化检测各时间点海马组织CAl、CA3和DG区Navl．2蛋白的表达变化；(至)Westemblot检测各时间点海马Navl．2的表达变化；@RT-PCR检测各时间点实验组海马Navl．2mRNA水平较对照组的变化情况。结果1．实验组大鼠SE诱发成功率为79．21％，死亡率为24．75％，模型成功率为54．45％。2．免疫组化结果示Navl．2在海马广泛表达，主要表达于突起和胞体。实验组SE后1天，7

3、天，15天，30天海马组织CAl、CA3及DG区Navl．2的表达相对于对照组无统计学差异(P>O．05)；SE后60天海马组织CAl和CA3区Navl．2的表达相较对照组明显降低(P<0．05)，DG区则无明显变化(P>O．05)。3．Westernblot结果显示SE后各时间点实验组海马组织Nayl．2本研究得到国家自然科学基金青年基金(编号81000553)资助八年制博士学位论文中文摘要的表达与对照组相比无统计学差异(P>O．05)。4．RT-PCR结果示SE后1天，7天，15天，30天实验组Navl．2mRNA水平与对照组相比无统计学差异(P>0．05)

4、；SE后60天实验组Navl．2mRNA水平相对于对照组明显降低(P

5、ted250士209、)wererandomlydividedintocontrolgroupandTLEgroup．TheratsinTLEgroupwereinjectedlithiumchlorideandpilocarpine，whilethecontrolgroupreceivedsalinetreatmentinsteadofpilocarpine．Werandomlychose6ratsfromtheTLEgroupand3fromcontrolgrouptoplacehippocampalelectrodesbeforegivinglithium

6、chloride，andrecordedEEGat4stagesasbeforegivinglithiumchloride，duringSE，ldayafterSE，and7daysafterSE．TherestratsofTLEgroupandcontrolgroupwererandomlydividedinto5subgroupsaccordingtodifferenttimeafterSE，suchas1dayafterSE，7daysafterSE，15daysafterSE，30daysafterSE，60daysafterSE．Thenwesacri

7、ficedthematthedefinedtimeforfurtherimmunohistochemisty,WesternblotandQuantitativereal．time．PCRexaminationforstudyingNayl．2dynamicexpressioninhippocampus．Results1．Thelithium-pilocarpinemodelofTLE：SEwasinducedattheachievementratioof79．21％andthetotalmortalitywas22．75％．2．Theimmunohistoch

8、emistystudys