姜黄素体内外给药及含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响论文

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1、姜黄素体内外给药及含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响论文冯文茹，赵秀梅，刘利萍，胡人杰【摘要】目的探讨姜黄素3种不同给药途径对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法通过噻唑蓝（MTT）比色法比较姜黄素3种给药途径对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果姜黄素体内给药和含药血清能够促进小鼠脾淋巴细胞的增殖，体外实验证实姜黄素能够抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖，并呈量效关系。结论姜黄素与其代谢产物对淋巴细胞增殖作用的影响是相反的。【关键词】姜黄素；淋巴细胞；含药血清Abstract：ObjectiveToprobeintothehyperplasyeff

2、ectofdifferentcurcumineadministeredapproachesforthespleniclymphocyteofmice.MethodsTheeffectofcurcumineontheproliferationofspleenlymphocytesthroughthreedifferentadministrationroutesinedineadministratedinvivoanditsdrugserumupregulatedtheproliferationofspleenlymphocyte

3、s.Out-of-bodyexperiencecertifiedcurcuminecouldsuppressthehyperplasyofthemicespleniclymphocyte.Itpresenteddose-effectrelationship.ConclusionItiscontrarythattheeffectofcurcumineanditsmetaboliteontheproliferationofspleenlymphocytes.Keyin;Lymphocyte;Drugserum姜黄素是中药姜黄的主要

4、成分，有很重要的经济价值和广泛的药理作用。如抗氧化、抗炎、降血脂、抗肿瘤等［1］。近些年来有关姜黄素生物活性的研究越来越多。体外实验证实姜黄素具有免疫调节的作用［2］，但其对体内给药的免疫调节的作用未见报道。本文通过体内外及血清药理学的对比实验着重对此进行了研究观察.freela公司提供；四甲基偶氮唑蓝（MTT），北京欣经科生物技术有限公司产品，批号：T15051/15181；姜黄素，由本所植化室提供；小牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司产品，批号：061201。CO2孵箱，REVCO；电子天平，METTLER，AE240

5、；96孔板，由greinerbio-one提供；酶标仪，sDragom。2方法2.1姜黄素体内对小鼠脾淋巴细胞转化的影响ICR小鼠60只，分为5组，即正常对照组和姜黄素4个剂量组，对照组每日灌胃生理盐水，姜黄素给药组分别每日灌胃给药50，100，200和400mg/kg的姜黄素。连续给药7d，于末次给药后，取各种小鼠脾脏无菌制备单个脾细胞悬液，调整细胞浓度为4×106/ml，置于96孔板中，并增设ConA对照组（浓度为5μg/ml），该组细胞悬液取自正常对照组。取每只小鼠的脾细胞悬液75μl加入96孔板中，并设4个复孔。除正常

6、对照组，其余各组均加入25μlConA；随后，正常对照组加入125μlRPMI1640培养液，其余各组各孔均加入RPMI1640培养液100μl，使反应总体积为200μl/孔。置5%CO2孵箱37℃培养72h，培养结束前4h，每孔加入10μlMTT(5mg/ml)，继续培养4h，培养结束后，1000r/min离心10min，弃上清液，每孔加入150μlDMSO，充分振荡后室温静置10min。进行酶标仪检测，读取A570nm值。2.2姜黄素体外对小鼠脾淋巴细胞转化的影响在无菌条件下，常规制备脾细胞悬液，调整细胞浓度为4×106/

7、ml，然后按实验分组：细胞对照组、ConA对照组、ConA＋姜黄素组。将新分离的小鼠脾细胞悬液加入96孔板中，各组均加入细胞悬液75μl/孔，ConA对照组和ConA＋姜黄素组加ConA25μl/孔。然后ConA＋姜黄素组加入含有不同浓度姜黄素（0.88，1.76，3.52，7.03，14.06，28.13，56.25，112.5，225μg/ml）的RPMI1640培养液100μl/孔。设4个复孔。姜黄素药物对照组加入含上述不同浓度姜黄素的RPMI1640培养液100μl，再加入RPMI1640培养液100μl。细胞对照组和

8、ConA对照组分别加入RPMI1640培养液，使反应总体积为200μl/孔。加样完毕置5%CO2孵箱37℃培养72h，培养结束前4h，每孔加入10μlMTT(5mg/ml)，继续培养4h，培养结束后，1000r/min离心10min，弃上清液，每孔加入150μlDMSO，充分