姜黄素体内外给药及含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响

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1、姜黄素体内外给药及含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响作者：冯文茹，赵秀梅，刘利萍，胡人杰【摘要】　　目的探讨姜黄素3种不同给药途径对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法通过噻唑蓝（MTT）比色法比较姜黄素3种给药途径对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。结果姜黄素体内给药和含药血清能够促进小鼠脾淋巴细胞的增殖，体外实验证实姜黄素能够抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖，并呈量效关系。结论姜黄素与其代谢产物对淋巴细胞增殖作用的影响是相反的。【关键词】姜黄素；淋巴细胞；含药血清　　Abstract：ObjectiveToprobeintothehyperplasyeffecto

2、fdifferentcurcumineadministeredapproachesforthespleniclymphocyteofmice.MethodsTheeffectofcurcumineontheproliferationofspleenlymphocytesthroughthreedifferentadministrationroutesinedineadministratedinvivoanditsdrugserumupregulatedtheproliferationofspleenlymphocytes.Out-of-body

3、experiencecertifiedcurcuminecouldsuppressthehyperplasyofthemicespleniclymphocyte.Itpresenteddose-effectrelationship.ConclusionItiscontrarythattheeffectofcurcumineanditsmetaboliteontheproliferationofspleenlymphocytes.　　Keyin;Lymphocyte;Drugserum　　姜黄素是中药姜黄的主要成分，有很重要的经济价值和广泛的药理

4、作用。如抗氧化、抗炎、降血脂、抗肿瘤等［1］。近些年来有关姜黄素生物活性的研究越来越多。体外实验证实姜黄素具有免疫调节的作用［2］，但其对体内给药的免疫调节的作用未见报道。本文通过体内外及血清药理学的对比实验着重对此进行了研究观察，以期为进一步研究其免疫药理作用提供实验依据。　　1材料　　1.1动物ICR小鼠雌性，体重18～20g，由北京大学医学部实验动物科学部提供，实验动物合格证编号：0034800。　　1.2试剂与仪器RPMI1640，批号1285082，GIBCO公司产品；刀豆蛋白（ConA），Sigma公司提供；四甲基偶氮唑蓝（MTT）

5、，北京欣经科生物技术有限公司产品，批号：T15051/15181；姜黄素，由本所植化室提供；小牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司产品，批号：061201。CO2孵箱，REVCO；电子天平，METTLER，AE240；96孔板，由grEinerbio-one提供；酶标仪，sDragom。　　2方法　　2.1姜黄素体内对小鼠脾淋巴细胞转化的影响ICR小鼠60只，分为5组，即正常对照组和姜黄素4个剂量组，对照组每日灌胃生理盐水，姜黄素给药组分别每日灌胃给药50，100，200和400mg/kg的姜黄素。连续给药7d，于末次给药后，取各种小鼠脾脏无

6、菌制备单个脾细胞悬液，调整细胞浓度为4×106/ml，置于96孔板中，并增设ConA对照组（浓度为5μg/ml），该组细胞悬液取自正常对照组。取每只小鼠的脾细胞悬液75μl加入96孔板中，并设4个复孔。除正常对照组，其余各组均加入25μlConA；随后，正常对照组加入125μlRPMI1640培养液，其余各组各孔均加入RPMI1640培养液100μl，使反应总体积为200μl/孔。置5%CO2孵箱37℃培养72h，培养结束前4h，每孔加入10μlMTT(5mg/ml)，继续培养4h，培养结束后，1000r/min离心10min，弃上清液，每孔加

7、入150μlDMSO，充分振荡后室温静置10min。进行酶标仪检测，读取A570nm值。　　2.2姜黄素体外对小鼠脾淋巴细胞转化的影响在无菌条件下，常规制备脾细胞悬液，调整细胞浓度为4×106/ml，然后按实验分组：细胞对照组、ConA对照组、ConA＋姜黄素组。将新分离的小鼠脾细胞悬液加入96孔板中，各组均加入细胞悬液75μl/孔，ConA对照组和ConA＋姜黄素组加ConA25μl/孔。然后ConA＋姜黄素组加入含有不同浓度姜黄素（0.88，1.76，3.52，7.03，14.06，28.13，56.25，112.5，225μg/ml）的R

8、PMI1640培养液100μl/孔。设4个复孔。姜黄素药物对照组加入含上述不同浓度姜黄素的RPMI1640培养液100μl，再加入RPMI1640培养