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1、二至丸与失笑散对胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA的调控论文陈珺明安德明柳涛郑培永邢练军季光【摘要】目的研究不同治则中药复方二至丸与失笑散对胆汁淤积性肝纤维化大鼠uPA/PAI-1纤溶途经的调控作用。方法SD雄性大鼠60只随机分为假手术组和造模组,造模组于1周后随机分为模型对照组、二至丸组、失笑散组及合方组。各治疗组分别给予相应药物灌胃,模型对照组和假手术组给予等量生理盐水灌胃,4周末处死大鼠。观察内容包括一般情况、肝功能、肝组织病理、ethodsSixtymaleSprague-Dalydividedin
2、to2groups:Shamoperationgroupandmodelgroup.Bileductligationmethodakethemodelofcholestasis-inducedliverfibrosis.Oneodelgroupratslydividedintofourgroups:Untreatedgroup,Erzhiedicineinterventiongroupedicinebyintragastricadministration.Shamoperationgroupandun
3、treatedgroupchloridepled.Generalstateofhealth,.freelinotransferase(ALT),aspartateaminotransferase(AST),alkalinephosphatase(ALP),totalbilirubin(TBil),andpathologicalhistologyofhepatictissueeasured.uPAerasechainraction(RT-PCR)andPAI-1ALP,ALTandASTlevelsin
4、threeChinesemedicineplexprescriptiongroupratsandtheserumlevelofTBilinShixiaosanandECSgroupratsodelgroup(P0.01).ECSplerecipeinALPandALT.Allofthreeplexprescriptionscouldinhibitliverfibrosistosomeextent(P0.01),butECSoreobviouslythansimplerecipe.PAI-1mRNAex
5、pressionedicineplexprescriptiongroupsasparedtomodelgroup(P0.01),ECSgroupdeicineplexprescriptions(ErzhiprovetheHepaticfunctionofcholestasis-inducedliverfibrosisrats,alleviatehepaticfibrosis,andECSisbetterthansimplerecipe.Themechanismmayberelatedtoregulat
6、ingtheuPA/PAI-1fibrinolyticsystem.Keyatrix,ECM)合成增多而降解相对减少.freelatrixmetalloproteinase,MMP)家族的活性,以维持ECM合成与降解之间的平衡。祖国医学普遍认为,“正虚血淤”是肝纤维化的基本病机[1]。本研究旨在观察补益肝肾和活血化淤的经典名方二至丸和失笑散及其合方对大鼠胆汁淤积性肝纤维化形成的影响及其对uPA/PAI的调控作用,为中医药防治以细胞外基质沉积为特征的肝纤维化提供更广阔的途径。1材料与仪器1.1动物SD雄
7、性大鼠60只,SPF级,体重(260±20)g,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号:SCXK(沪)2003-0003。饲养于上海中医药大学附属龙华医院实验动物中心,自由饮食。1.2试剂与器材盐酸氯胺酮(上海第一生化药业公司,国药准字:H31021897);HE、天狼猩红染液(上海虹桥乐翔医用试剂有限公司);血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TBil)、血清碱性磷酸酶(ALP)试剂盒(南京建成生物工程研究所);DEPC(Sigma);TrizolR
8、ea-gent、AMVRT/PCRKit、DNAMarker、引物合成(上海申能博彩生物科技有限公司);UV-2102C分光光度计(尤尼克公司);PCR仪、DNA水平(Biorad);RNA/DNAcalculator(Pharmacia);凝胶成像系统(上海四星生物技术有限公司);uPA抗体试剂盒(SantaCruzBiotechnologyINC)。1.3药物制备二至丸出自清·汪昂《医方集解》,由旱莲草、女贞子等份(各9g)组成;失笑散出自宋·《太平